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新型鸭呼肠孤病毒σC基因原核表达及其抗原性的初步研究

王锦祥 程晓霞 陈少莺 陈仕龙 林锋强 王劭 李兆龙

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新型鸭呼肠孤病毒σC基因原核表达及其抗原性的初步研究

    通讯作者: 陈少莺(1962- ),女,硕士,研究员,主要从事动物传染病病原与防治研究(E-mail:chensy58@163.com)
  • 基金项目:

    国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A209);福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2013R1025-1)

  • 中图分类号: S852

Prokaryotic Expression and Initial Antigenicity Analysis of Novel Duck Reovirus σC Protein

  • 摘要: 应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒 σC 基因,分析 σC 蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03 株 S1 基因序列,针对 σC 基因设计并合成 1 对特异性引物,用 RT-PCR 扩增该基因,并将此片段克隆到原核表达载体 pET-30a(+)上,将序列正确的重组质粒命名为 pET-NDRV-σC,转化大肠杆菌 BL21(DE3)感受态细胞,1.0 mmol·L-1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示,RT-PCR 扩增得到 966 bp 的目的片段;表达产物经 SDS-PAGE 分析,获得了与预期相符的约 41.3 ku 的条带,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting 分析显示,重组蛋白能与 NDRV 阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得 NDRV σC 蛋白,并证明其具有免疫反应性。
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出版历程
    收稿日期: 
  • 初稿:  2013-11-25
  • 修改稿:  2014-03-10

新型鸭呼肠孤病毒σC基因原核表达及其抗原性的初步研究

    通讯作者: 陈少莺, chensy58@163.com
  • 1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所, 福建 福州 350013;
  • 2. 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心, 福建 福州 350013
基金项目:  国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A209);福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2013R1025-1)

摘要: 应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒 σC 基因,分析 σC 蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03 株 S1 基因序列,针对 σC 基因设计并合成 1 对特异性引物,用 RT-PCR 扩增该基因,并将此片段克隆到原核表达载体 pET-30a(+)上,将序列正确的重组质粒命名为 pET-NDRV-σC,转化大肠杆菌 BL21(DE3)感受态细胞,1.0 mmol·L-1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示,RT-PCR 扩增得到 966 bp 的目的片段;表达产物经 SDS-PAGE 分析,获得了与预期相符的约 41.3 ku 的条带,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting 分析显示,重组蛋白能与 NDRV 阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得 NDRV σC 蛋白,并证明其具有免疫反应性。

English Abstract

参考文献 (15)

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