N-hydroxyamobarbital-producing Bacillus-like Strains
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摘要: 采用液相-四级杆飞行时间质谱的方法筛选产N-羟基异戊巴比妥（N-Hydroxy Amobarbital）的芽胞杆菌菌株。通过分析73株芽胞杆菌菌株发酵液中胞外化合物成分，筛选出合成N-Hydroxy Amobarbital的4株芽胞杆菌，为栗褐芽胞杆菌Bacillus plakortidis（FJAT-8757）、内生芽胞杆菌Bacillus endophyticus（FJAT-10010）、米氏解硫胺素芽胞杆菌Aneurinibacillus migulanus（FJAT-14205）和休闲地芽胞杆菌Bacillus novalis（FJAT-14227），该成分在发酵液中的相对含量分别为6.04%、4.85%、1.61%和1.61%，ATPA与色谱库检索得分（Score）分别为96.25、94.33、96.72和94.91。
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关键词:
- LC-QTOF MS /
- 芽胞杆菌 /
- N-羟基异戊巴比妥 /
- 巴比妥
Abstract: Bacillus-like bacteria were screened for their N-hydroxyamobarbital productivities. Extracellular metabolites of 73 candidates were analyzed using the liquid chromatography-hybrid quadrupole time-of-flight mass spectrometry (LC-QTOF MS) and Metlin database. The relative contents of N-hydroxyamobarbital in the culture media on strains that showed substantial levels were 6.04%, 4.85%, 1.61% and 1.61% for B. plakortidis FJAT-8757, B. endophyticus FJAT-10010, Aneurinibacillus migulanus FJAT-14205, and B. novalis FJAT-14227, respectively. The specialized m/z scores on FJAT-8757, FJAT-10010, FJAT-14205 and FJAT-14227 matched to ATPA were 96.25, 94.33, 96.72 and 94.91, respectively.-
Key words:
- LC-QTOF MS /
- Bacillus /
- N-hydroxyamobarbital /
- barbiton
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图 1 离子提取色谱
注：A为栗褐芽胞杆菌FJAT-8757 N-羟基戊巴比妥离子提取色谱图，B为内生芽胞杆菌FJAT-10010 N-羟基戊巴比妥离子提取色谱图，C为米氏解硫胺素芽胞杆菌FJAT-14205 N-羟基戊巴比妥离子提取色谱图，D为休闲地芽胞杆菌FJAT-14227 N-羟基戊巴比妥离子提取色谱图。
Figure 1. Extracted ion chromatogram
图 2 栗褐芽胞杆菌FJAT-8757中N-羟基戊巴比妥扫描质谱
Figure 2. Scanning mass spectrum of N-hydroxyamobarbital from B.badius FJAT-8757
图 3 栗褐芽胞杆菌FJAT-8757中N-羟基戊巴比妥分子特征提取质谱
Figure 3. MFE spectrum of N-hydroxyamobarbital from B. badius FJAT-8757
表 1 供试芽胞杆菌菌株
Table 1. Bacillus strains tested
序号 供试菌株数量 学名 中文名称 属名 1 1 Aneurinibacillus aneurinilyticus 解硫胺素硫胺素芽胞杆菌 解硫胺素芽胞杆菌 2 1 Aneurinibacillus migulanus 米氏解硫胺素芽胞杆菌 解硫胺素芽胞杆菌 3 1 Bacillus acidiceler 酸快生芽胞杆菌 芽胞杆菌属 4 1 Bacillus alcalophilus 嗜碱芽胞杆菌 芽胞杆菌属 5 4 Bacillus amyloliquefaciens 解淀粉芽胞杆菌 芽胞杆菌属 6 10 Bacillus anthracis 炭疽芽胞杆菌 芽胞杆菌属 7 4 Bacillus aryabhattai 阿氏芽胞杆菌 芽胞杆菌属 8 1 Bacillus azotoformans 产氮芽胞杆菌 芽胞杆菌属 9 1 Bacillus badius 栗褐芽胞杆菌 芽胞杆菌属 10 1 Bacillus butanolivorans 食丁酸芽胞杆菌 芽胞杆菌属 11 1 Bacillus cecembensis 科研中心芽胞杆菌 芽胞杆菌属 12 1 Bacillus cellulosilyticus 解纤维素脂环酸芽胞杆菌 芽胞杆菌属 13 2 Bacillus cereus 蜡样芽胞杆菌 芽胞杆菌属 14 1 Bacillus cibi 食物芽胞杆菌 芽胞杆菌属 15 1 Bacillus circulans 环状芽胞杆菌 芽胞杆菌属 16 12 Bacillus clausii 克劳芽胞杆菌 芽胞杆菌属 17 1 Bacillus coagulaus 凝结芽胞杆菌 芽胞杆菌属 18 1 Bacillus endophyticus 内生芽胞杆菌 芽胞杆菌属 19 1 Bacillus firmus 坚强芽胞杆菌 芽胞杆菌属 20 2 Bacillus fordii 福氏芽胞杆菌 芽胞杆菌属 21 1 Bacillus ginsengihumi 人参土芽胞杆菌 芽胞杆菌属 22 1 Bacillus hemicellulosilyticus 解半纤维素芽胞杆菌 芽胞杆菌属 23 1 Bacillus indicus 印度芽胞杆菌 芽胞杆菌属 24 1 Bacillus isronensis 印空研芽胞杆菌 芽胞杆菌属 25 1 Bacillus koreensis 韩国芽胞杆菌 芽胞杆菌属 26 1 Bacillus lehensis 列城芽胞杆菌 芽胞杆菌属 27 10 Bacillus licheniformis 地衣芽胞杆菌 芽胞杆菌属 28 1 Bacillus megaterium 巨大芽胞杆菌 芽胞杆菌属 29 2 Bacillus methylotrophicus 甲基营养型芽胞杆菌 芽胞杆菌属 30 1 Bacillus novalis 休闲地芽胞杆菌 芽胞杆菌属 31 1 Bacillus plakortidis 海绵芽胞杆菌 芽胞杆菌属 32 1 Bacillus.flexus 弯曲芽胞杆菌 芽胞杆菌属 33 2 Fictibacillus barbaricus 奇异虚构芽胞杆菌 虚构芽胞杆菌属 
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表 2 产N-羟基戊巴比妥芽胞杆菌
Table 2. N-hydroxyamobarbital-producing Bacillus strains
序号 菌株名称 菌株编号 保留时间
/min匹配度 相对含量
/%精确分子量 质核比 CAS 1 栗褐芽胞杆菌 FJAT-8757 1.7761 96.25 6.04 242.1260 241.1189 62298-51-5 2 内生芽胞杆菌 FJAT-10010 1.7759 94.33 4.85 242.1257 241.1186 62298-51-5 3 米氏解硫胺素芽胞杆菌 FJAT-14205 1.6689 96.72 1.61 242.1269 241.1198 62298-51-5 4 休闲地芽胞杆菌 FJAT-14227 1.6630 94.91 1.61 242.1276 241.1204 62298-51-5
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