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红双喜月季高效组织培养快繁技术

刘子平 赵春莉 李金英 姚思扬 刘翰升 潘珠峰

刘子平, 赵春莉, 李金英, 姚思扬, 刘翰升, 潘珠峰. 红双喜月季高效组织培养快繁技术[J]. 福建农业学报, 2019, 34(1): 61-69. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.010
引用本文: 刘子平, 赵春莉, 李金英, 姚思扬, 刘翰升, 潘珠峰. 红双喜月季高效组织培养快繁技术[J]. 福建农业学报, 2019, 34(1): 61-69. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.010
LIU Zi-ping, ZHAO Chun-li, LI Jin-ying, YAO Si-yang, LIU Han-sheng, Pan zhu-feng. Rapid Propagation of Double Delight Chinese Rose Using Tissue Culture[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2019, 34(1): 61-69. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.010
Citation: LIU Zi-ping, ZHAO Chun-li, LI Jin-ying, YAO Si-yang, LIU Han-sheng, Pan zhu-feng. Rapid Propagation of Double Delight Chinese Rose Using Tissue Culture[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2019, 34(1): 61-69. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.010

红双喜月季高效组织培养快繁技术

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.010
基金项目: 

吉林省联合重点实验室开放基金项目 CWE18-4

详细信息
    作者简介:

    刘子平(1993-), 女, 硕士研究生, 研究方向:园林植物资源与种质创新(E-mail:1738309862@qq.com)

    通讯作者:

    赵春莉(1973-), 女, 博士, 副教授, 研究方向:园林植物生物技术及种质资源(E-mail:zcl8368@163.com)

  • 中图分类号: S685.12

Rapid Propagation of Double Delight Chinese Rose Using Tissue Culture

  • 摘要:   目的  筛选出红双喜月季各阶段最佳培养条件,并建立组培快繁技术体系,为工厂化生产提供科学依据及技术指导。  方法  以红双喜月季茎段为试验材料,采用正交设计和随机区组设计等试验方法,开展红双喜月季初代培养、继代增殖、生根培养以及炼苗移栽的研究。  结果  茎段最佳灭菌处理为75% C2H5OH 30 s+0.1% HgCl2 6 min;最适初代诱导培养基为MS+3.00 mg·L-1 6-BA+0.30 mg·L-1 NAA,诱导率高达95.56%;最适增殖培养基为MS+1.00 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 IBA,增殖系数高达6.61;最适生根培养基为1/4MS+0.05 mg·L-1IBA+2.50 g/L活性炭,生根率高达95.56%;最适移栽基质为V细沙:V蛭石:V珍珠岩:V椰糠=1:2:3:1,移栽成活率高达98.33%。  结论  通过茎段直接诱导丛生芽,可以建立红双喜月季高效快繁技术体系。
  • 图  1  红双喜月季组织培养

    注:A为增殖苗;B为生根苗;C为移栽苗;D为移栽3个半月后苗。

    Figure  1.  Tissue culture of Double Delight Chinese rose

    Note:A is a proliferating seedling.B is rooting seedling.C is transplanted seedling. D is a seedling cultured for 3 and a half months after transplanting.

    表  1  灭菌时间对外植体接种的影响

    Table  1.   Effect of disinfection time on explant inoculation

    处理
    Treatment
    灭菌时间Disinfection time/min 污染率
    Contamination rate/%
    死亡率
    Mortality rate/%
    75%酒精
    75% alcohol
    0.1%升汞
    0.1% mercuric chloride
    A1 0.25 4 65.56±0.96a 0
    A2 0.25 5 58.89±0.91b 0
    A3 0.25 6 34.44±0.76e 0
    A4 0.25 7 18.89±0.94g 4.44±0.56c
    A5 0.50 4 57.78±0.84b 0
    A6 0.50 5 45.56±0.96c 0
    A7 0.50 6 2.22±1.92h 0
    A8 0.50 7 0 17.78±0.94b
    A9 0.75 4 41.11±2.26d 2.22±1.92d
    A10 0.75 5 24.44±0.50f 3.33±0.38d
    A11 0.75 6 0 18.89±0.13b
    A12 0.75 7 0 26.67±1.53a
    注:同列数据后不同字母者表示差异达显著水平(P<0.05)。表 2~8同。
    Note:The difference between different letters after the same column data reached a significant level(P<0.05).The same as table 2-8.
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    表  2  诱导率正交试验极差分析及多重比较

    Table  2.   Extreme difference analysis and multiple comparison on induction rates obtained from orthogonal test

    处理
    Treatment
    因素Factor 诱导率
    Inductivity/%
    A:基本培养基
    Minimal medium
    B:6-BA 6-Benzylaminopurine
    /(mg·L-1)
    C:NAA 1-naphthlcetic acid
    /(mg·L-1)
    1 1(MS) 1(1.00) 1(0.10) 83.33±3.34b
    2 1 2(2.00) 2(0.20) 47.78±5.09c
    3 1 3(3.00) 3(0.30) 95.56±1.93a
    4 2(B5) 1 2 20.00±3.33de
    5 2 2 3 11.11±3.85f
    6 2 3 1 14.44±1.93ef
    7 3(WPM) 1 3 16.67±3.34ef
    8 3 2 1 23.33±3.34d
    9 3 3 2 18.89±3.85de
    X1 75.56 a 40.00 a 40.37 a
    X2 15.18 b 27.41 b 28.89 b
    X3 19.63 b 42.96 a 41.11 a
    R 60.37 15.56 11.48
    最优组合 A1 B3 C3
    注:Xv1X2X3分别为各列各水平诱导率均值;R为极值。
    Note:X1, X2, X3 are the mean values of induction rate at each level in each column, R is the extreme value.
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    表  3  6-BA、IBA水平间增殖系数的多重比较

    Table  3.   Multiple comparison on proliferation coefficients between 6-BA and IBA levels

    6-BA
    6-Benzylaminopurine/
    (mg·L-1)
    均值
    Mean value
    IBA
    Indole-3-Butytric acid(mg·L-1)
    均值
    Mean value
    0.50 4.40b 0.10 5.20a
    1.00 5.12a 0.20 4.65b
    1.50 3.78c 0.30 3.40c
    2.00 2.34d 0.40 2.39d
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    表  4  不同质量浓度6-BA与IBA配比对增殖的影响

    Table  4.   Effects of 6-BA and IBA concentrations on seedling proliferation

    处理
    Treatment
    6-BA 6-Benzylaminopurine
    /(mg·L-1)
    IBA Indole-3-Butytric acid/(mg·L-1) 增殖系数
    Propagation coefficient
    生长状态
    Growing status
    B1 0.50 0.10 6.07±0.20b 叶片绿色,株高4 cm左右
    B2 0.50 0.20 5.19±0.23c 叶片翠绿色,株高4.5 cm左右
    B3 0.50 0.30 4.15±0.15e 部分叶片黄色,株高4.8 cm左右
    B4 0.50 0.40 2.20±0.10i 叶片绿色,株高3 cm左右
    B5 1.00 0.10 6.61±0.11a 叶片翠绿,较多腋芽,株高6 cm左右
    B6 1.00 0.20 5.99±0.19b 腋芽叶片黄绿色,株高7 cm左右
    B7 1.00 0.30 4.01±0.15ef 叶绿色个别脱落,株高5.5 cm左右
    B8 1.00 0.40 3.85±0.29f 叶片黄绿色,株高4 cm左右
    B9 1.50 0.10 4.73±0.06d 叶小绿色,株高3.5 cm左右
    B10 1.50 0.20 4.55±0.11d 叶片微卷,株高8 cm左右
    B11 1.50 0.30 3.58±0.23g 叶翠绿色较小,株高5 cm左右
    B12 1.50 0.40 2.25±0.05i 叶黄脱落,基部有愈伤,株高3 cm左右
    B13 2.00 0.10 3.40±0.56g 叶小,部分发白,株高3.5 cm左右
    B14 2.00 0.20 2.86±0.02h 叶浅绿色,株高4 cm左右
    B15 2.00 0.30 1.84±0.02j 叶绿色,株高3 cm左右
    B16 2.00 0.40 1.25±0.04k 叶基部浅黄色,株高2.5 cm左右
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    表  5  基本培养基对生根的影响

    Table  5.   Effect of basal medium on rooting of seedlings

    处理
    Treatment
    基本培养基
    Minimal medium
    IBA
    Indole-3-Butytric acid/(mg·L-1)
    生根率
    Rooting rate
    /%
    平均根数
    Average rootnumber/条
    平均根长
    Average root length/cm
    生长状态
    Growing status
    C1 MS 0.10 76.67±3.34b 3.50 2.00 褐色,细弱
    C2 1/2MS 0.10 54.44±1.93c 2.10 4.80 白色,较粗
    C3 1/4MS 0.10 84.44±5.09a 5.10 4.30 白色,较粗
    C4 1/6MS 0.10 72.22±3.85b 7.60 6.00 黄褐色,较细
    注:生根率为均值±标准差;表 67同。
    Note:Rooting rate is mean±standard deviation, table 6 and 7 identical.
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    表  6  不同浓度IBA、NAA对生根的影响

    Table  6.   Effect of IBA and NAA concentrations on rooting of seedlings

    处理
    Treatment
    培养基
    Medium
    IBA
    Indole-3-Butytric acid/(mg·L-1)
    NAA
    Naphthlcetic acid/(mg·L-1)
    生根率
    Rooting rate/%
    平均根数
    Average root number/条
    平均根长
    Average root length/cm
    生长状态
    Growing status
    D1 1/4MS 0.05 - 91.11±6.94a 5.40 4.90 白色,粗
    D2 1/4MS 0.10 - 84.44±5.09a 5.10 4.30 白色,较粗
    D3 1/4MS 0.15 - 71.11±5.09b 5.60 2.10 黑色,细弱
    D4 1/4MS - 0.05 60.00±3.33cd 1.00 2.50 黄褐色,细弱
    D5 1/4MS - 0.10 67.78±6.94bc 2.30 3.20 黄白色,较粗壮
    D6 1/4MS - 0.15 54.44±5.09d 3.50 4.70 褐色,较细
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    表  7  不同活性炭浓度对生根的影响

    Table  7.   Effect of activated carbon concentration on rooting of seedlings

    处理
    Treatment
    活性炭浓度
    Activated carbon concentration/(g·L-1)
    生根率
    Rooting rate
    /%
    平均根数
    Average root number/条
    平均根长
    Average root length/cm
    生长状态
    Growing status
    E1 0 91.11±5.09 ab 4.20 4.50 根较粗,白色
    E2 1.50 76.67±3.34 d 3.50 3.20 根细,白色
    E3 2.00 80.00±3.34 cd 3.00 6.50 根细,白色
    E4 2.50 95.56±1.93 a 4.60 5.30 根较细,白色
    E5 3.00 85.56±5.09 bc 5.20 5.60 根细,白色
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    表  8  不同基质正交试验结果极差分析及多重比较

    Table  8.   Range analysis and multiple comparisons on culture media tested with orthogonal matrix

    处理
    Treatment
    因素Factor 成活率
    Survival rate/%
    A(细沙)Fine sand B(蛭石)Vermiculite C(珍珠岩)Perlite D(椰糠)Coconut bran
    F1 0 1 1 0 63.33±5.77 de
    F2 0 2 2 1 76.67±2.89 c
    F3 0 3 3 2 70.00±5.00 cd
    F4 1 1 2 2 55.00±5.00 f
    F5 1 2 3 0 96.67±2.89 a
    F6 1 3 1 1 86.67±5.77 b
    F7 2 1 3 1 66.67±2.89 de
    F8 2 2 1 2 75.00±5.00 c
    F9 2 3 2 0 61.67±2.89 ef
    X1 70.00 b 61.67 c 75.00 a 74.44 a
    X2 80.00 a 83.33 a 64.67 b 76.67 a
    X3 67.78 b 72.78 b 78.33 a 66.67 b
    R 12.22 21.67 13.87 10.00
    最优组合 A2 B2 C3 D2
    注:X1X2X3分别为各列各水平成活率均值,R为极值。
    Note:X1X2X3 are the mean values of survival rate at each level in each column, R is the extreme value.
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出版历程
  • 收稿日期:  2018-05-12
  • 修回日期:  2018-11-14
  • 刊出日期:  2019-01-28

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