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基于Illumina Hiseq 4000 高通量测序平台的暗色唇鲮线粒体基因组特征分析

韩耀全 黄励 朱琼华 吴伟军 何安尤 施军 李育森

韩耀全,黄励,朱琼华,等. 基于Illumina Hiseq 4000 高通量测序平台的暗色唇鲮线粒体基因组特征分析 [J]. 福建农业学报,2020,35(2):130−139 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.003
引用本文: 韩耀全,黄励,朱琼华,等. 基于Illumina Hiseq 4000 高通量测序平台的暗色唇鲮线粒体基因组特征分析 [J]. 福建农业学报,2020,35(2):130−139 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.003
HAN Y Q, HUANG L, ZHU Q H, et al. Characteristics of Mitochondrial Genomes of Semilabeo obscures Analyzed Using Illumina Hiseq 4000 High-throughput Sequencing Technique [J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences,2020,35(2):130−139 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.003
Citation: HAN Y Q, HUANG L, ZHU Q H, et al. Characteristics of Mitochondrial Genomes of Semilabeo obscures Analyzed Using Illumina Hiseq 4000 High-throughput Sequencing Technique [J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences,2020,35(2):130−139 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.003

基于Illumina Hiseq 4000 高通量测序平台的暗色唇鲮线粒体基因组特征分析

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.003
基金项目: 广西自然科学基金重大专项(2013GXNSFEA053003);广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室建设项目(17-259-29)
详细信息
    作者简介:

    韩耀全(1969−),男,高级工程师,主要从事水生生物自然资源及水生生态调查、保护与修复工作(E-mail:hyqao@sohu.com

  • 中图分类号: Q 173;Q 959.46+8

Characteristics of Mitochondrial Genomes of Semilabeo obscures Analyzed Using Illumina Hiseq 4000 High-throughput Sequencing Technique

  • 摘要:   目的  研究暗色唇鲮(Semilabeo obscurus)的分子遗传学特性,为暗色唇鲮种质资源遗传多样性分析和分子标记研究提供基础数据。  方法  利用高通量第二代测序技术,构建暗色唇鲮线粒体基因组全序列,分析序列的结构特征。  结果  暗色唇鲮的线粒体基因组全序列长度16 598~16 599 bp,GC含量42.65%~42.7%,共含有13个蛋白编码基因、22个tRNA、2个rRNA(12S-rRNA和16S-rRNA)以及1个控制区。线粒体基因组除ND6外,GC-skew值均为负值,COXI、ND3以及ND6的AT-skew值为负值,其余基因的AT-skew值均为正值。暗色唇鲮的13个蛋白编码基因氨基酸总长为3 794 aa,偏好密码子(RSCU>2)分别是终止密码子Arg(CGA)、Gly(GGA)、Leu(CTA)、Pro(CCA)、Ser(TCA)以及终止密码子Stp(TAA)。暗色唇鲮(唇鲮属Semilabeo)与泉水鱼Pseudogyrinocheilus prochilus的亲缘关系最近,和卷口鱼Ptychidio jordani、直口鲮Rectoris posehensis、异华鲮Parasinilabeo assimilis存在较高的亲缘关系。  结论  暗色唇鲮的线粒体基因组结构和基因排列顺序与鱼类基因组典型结构和排列一致。
  • 图  1  暗色唇鲮线粒体基因组结构和排列

    Figure  1.  Structures and sequences of mitochondrial genomes of S. obscures

    图  2  暗色唇鲮线粒体基因组密码子使用频率分布

    Figure  2.  Frequency distribution of codon usage in mitochondrial genomes of S. obscures

    图  3  暗色唇鲮的系统发育进化树

    Figure  3.  Phylogenetic trees based on nucleotides of S. obscures

    表  1  暗色唇鲮的线粒体基因组特征

    Table  1.   Characteristics of mitochondrial genomes of S. obscures

    基因/区域
    Gene /Area
    因子
    Factor
    云南暗
    色唇鲮
    YN
    贵州暗
    色唇鲮
    GZ
    广西暗
    色唇鲮
    GX
    全基因组
    Whole genome
    序列长度
    Length/bp
    16 598 16 598 16 599
    A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%
    57.30 57.33 57.35
    AT偏移率
    AT-skew
    0.113 4 0.112 4 0.112 8
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.265 1 −0.264 3 −0.264 6
    蛋白质编码基因
    Protein-coding genes
    序列长度
    Length(aa)
    3 794 3 794 3 794
    A和T碱基之和所占比例(总)
    AT Ratio /%(all)
    57.37 57.41 57.44
    每隔2个碱基取第3个碱基组成的新序列的A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%(3rd)
    58.98 59.00 59.00
    AT偏移率
    AT-skew
    0.084 4 0.082 6 0.082 8
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.332 1 −0.330 3 −0.330 6
    16S核糖体核糖核酸
    rrnL
    序列长度
    Length/bp
    1 686 1 686 1 686
    A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%
    56.58 56.58 56.70
    AT偏移率
    AT-skew
    0.314 5 0.314 5 0.313 8
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.090 2 −0.090 2 −0.090 4
    12S核糖体核糖核酸
    rrnS
    序列长度
    Length/bp
    956 956 956
    A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%
    51.78 51.67 51.67
    AT偏移率
    AT-skew
    0.256 6 0.255 1 0.255 1
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.102 −0.099 6 −0.099 6
    转运核糖核酸
    tRNAs
    序列长度
    Length/bp
    1 562 1 562 1 562
    A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%
    55.70 55.70 55.57
    AT偏移率
    AT-skew
    0.110 3 0.112 6 0.110 6
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.112 7 −0.115 6 −0.112 4
    控制区
    Control area
    序列长度
    Length/bp
    937 937 937
    A和T碱基之和所占比例
    AT Ratio/%
    66.7 66.92 66.81
    AT偏移率
    AT-skew
    0.004 8 0.008 0 0.016 0
    GC偏移率
    GC-skew
    −0.211 5 −0.219 4 −0.228 3
    下载: 导出CSV

    表  2  暗色唇鲮线粒体基因组注释结果(云南)

    Table  2.   Complete annotation of mitochondrial genome of S. obscures (YN)

    基因
    Gene
    编码链
    Coding strand
    起始位点
    Start position
    终止位点
    Stop position
    长度
    Size/bp
    GC含量
    G+C content/%
    氨基酸
    aa
    起始密码子
    Start codons
    终止密码子
    Stop codons
    反密码子
    Anticodon
    间隔碱基
    Intergenic nucleotide/bp
    tRNA-Phe H 1 69 69 43.48% GAA 0
    12S-rRNA H 70 1 025 956 48.22% 0
    tRNA-Val H 1 026 1 097 72 51.39% TAC 0
    16S-rRNA H 1 098 2 783 1 686 43.42% 0
    tRNA-Leu H 2 784 2 859 76 52.63% TAA 1
    ND1 H 2 861 3 835 975 44.31% 324 ATG TAA 4
    tRNA-Ile H 3 840 3 911 72 47.22% GAT −2
    tRNA-Gln L 3 910 3 980 71 42.25% TTG 1
    tRNA-Met H 3 982 4 050 69 57.97% CAT 0
    ND2 H 4 051 5 097 1 047 44.13% 348 ATG TAG −2
    tRNA-Trp H 5 096 5 166 71 38.03% TCA 2
    tRNA-Ala L 5 169 5 237 69 30.43% TGC 1
    tRNA-Asn L 5 239 5 311 73 47.95% GTT 33
    tRNA-Cys L 5 345 5 410 66 46.97% GCA 1
    tRNA-Tyr L 5 412 5 482 71 59.15% GTA 1
    COXI H 5 484 7 034 1 551 43.39% 516 GTG TAA 0
    tRNA-Ser L 7 035 7 105 71 49.30% TGA 3
    tRNA-Asp H 7 109 7 180 72 36.11% GTC 13
    COXII H 7 194 7 884 691 42.98% 230 ATG T 0
    tRNA-Lys H 7 885 7 960 76 46.05% TTT 1
    ATP8 H 7 962 8 126 165 39.39% 54 ATG TAA −7
    ATP6 H 8 120 8 803 684 40.64% 227 ATG TAA −1
    COXIII H 8 803 9 588 786 44.40% 261 ATG TAA −1
    tRNA-Gly H 9 588 9 659 72 34.72% TCC 0
    ND3 H 9 660 10 010 351 44.16% 116 ATG TAG −2
    tRNA-Arg H 10 009 10 078 70 47.14% TCG 0
    ND4L H 10 079 10 375 297 45.79% 98 ATG TAA −7
    ND4 H 10 369 11 749 1 381 41.42% 460 ATG T 0
    tRNA-His H 11 750 11 818 69 30.43% GTG 0
    tRNA-Ser H 11 819 11 887 69 36.23% GCT 1
    tRNA-Leu H 11 889 11 961 73 43.84% TAG 3
    ND5 H 11 965 13 788 1 824 40.90% 607 ATG TAA −4
    ND6 L 13 785 14 306 522 44.83% 173 ATG TAG 0
    tRNA-Glu L 14 307 14 375 69 39.13% TTC 4
    Cytb H 14 380 15 520 1 141 40.93% 380 ATG T 0
    tRNA-Thr H 15 521 15 592 72 51.39% TGT −1
    tRNA-Pro L 15 592 15 661 70 41.43% TGG 0
    D-loop H 15 662 16 598 937 33.30% 0
    下载: 导出CSV

    表  3  暗色唇鲮线粒体基因组注释结果(贵州)

    Table  3.   Complete annotation of mitochondrial genome of S. obscures (GZ)

    基因
    Gene
    编码链
    Coding strand
    起始位点
    Start position
    终止位点
    Stop position
    长度
    Size/bp
    GC含量
    G+C content/%
    氨基酸
    aa
    起始密码子
    Start codons
    终止密码子
    Stop codons
    反密码子
    Anticodon
    间隔碱基
    Intergenic nucleotide/bp
    tRNA-Phe H 1 69 69 43.48% GAA 0
    12S-rRNA H 70 1 025 956 48.33% 0
    tRNA-Val H 1 026 1 097 72 50.00% TAC 0
    16S-rRNA H 1 098 2 783 1 686 43.42% 0
    tRNA-Leu H 2 784 2 859 76 52.63% TAA 1
    ND1 H 2 861 3 835 975 44.41% 324 ATG TAA 4
    tRNA-Ile H 3 840 3 911 72 47.22% GAT −2
    tRNA-Gln L 3 910 3 980 71 42.25% TTG 1
    tRNA-Met H 3 982 4 050 69 57.97% CAT 0
    ND2 H 4 051 5 097 1 047 44.13% 348 ATG TAG −2
    tRNA-Trp H 5 096 5 166 71 38.03% TCA 2
    tRNA-Ala L 5 169 5 237 69 30.43% TGC 1
    tRNA-Asn L 5 239 5 311 73 47.95% GTT 33
    tRNA-Cys L 5 345 5 410 66 46.97% GCA 1
    tRNA-Tyr L 5 412 5 482 71 59.15% GTA 1
    COXI H 5 484 7 034 1 551 43.46% 516 GTG TAA 0
    tRNA-Ser L 7 035 7 105 71 49.30% TGA 3
    tRNA-Asp H 7 109 7 180 72 36.11% GTC 13
    COXII H 7 194 7 884 691 42.98% 230 ATG T 0
    tRNA-Lys H 7 885 7 960 76 46.05% TTT 1
    ATP8 H 7 962 8 126 165 38.79% 54 ATG TAA −7
    ATP6 H 8 120 8 803 684 40.35% 227 ATG TAA −1
    COXIII H 8 803 9 588 786 44.40% 261 ATG TAA −1
    tRNA-Gly H 9 588 9 659 72 36.11% TCC 0
    ND3 H 9 660 10 010 351 43.87% 116 ATG TAG −2
    tRNA-Arg H 10 009 10 078 70 47.14% TCG 0
    ND4L H 10 079 10 375 297 45.79% 98 ATG TAA −7
    ND4 H 10 369 11 749 1 381 41.49% 460 ATG T 0
    tRNA-His H 11 750 11 818 69 30.43% GTG 0
    tRNA-Ser H 11 819 11 887 69 36.23% GCT 1
    tRNA-Leu H 11 889 11 961 73 43.84% TAG 3
    ND5 H 11 965 13 788 1 824 40.73% 607 ATG TAA −4
    ND6 L 13 785 14 306 522 45.02% 173 ATG TAG 0
    tRNA-Glu L 14 307 14 375 69 39.13% TTC 4
    Cytb H 14 380 15 520 1 141 40.84% 380 ATG T 0
    tRNA-Thr H 15 521 15 592 72 51.39% TGT −1
    tRNA-Pro L 15 592 15 661 70 41.43% TGG 0
    D-loop H 15 662 16 598 937 33.08% 0
    下载: 导出CSV

    表  4  暗色唇鲮线粒体基因组注释结果(广西)

    Table  4.   Complete annotation of mitochondrial genome of S. obscures (GX)

    基因
    Gene
    编码链
    Coding strand
    起始位点
    Start position
    终止位点
    Stop position
    长度
    Size/bp
    GC含量
    G+C content/%
    氨基酸
    aa
    起始密码子
    Start codons
    终止密码子
    Stop codons
    反密码子
    Anticodon
    间隔碱基
    Intergenic nucleotide/bp
    tRNA-Phe H 1 69 69 44.93% GAA 0
    12S-rRNA H 70 1 025 956 48.33% 0
    tRNA-Val H 1 026 1 097 72 51.39% TAC 0
    16S-rRNA H 1 098 2 783 1 686 43.30% 0
    tRNA-Leu H 2 784 2 859 76 52.63% TAA 1
    ND1 H 2 861 3 835 975 44.41% 324 ATG TAA 4
    tRNA-Ile H 3 840 3 911 72 47.22% GAT −2
    tRNA-Gln L 3 910 3 980 71 42.25% TTG 1
    tRNA-Met H 3 982 4 050 69 57.97% CAT 0
    ND2 H 4 051 5 097 1 047 44.13% 348 ATG TAG −2
    tRNA-Trp H 5 096 5 166 71 38.03% TCA 2
    tRNA-Ala L 5 169 5 237 69 30.43% TGC 1
    tRNA-Asn L 5 239 5 311 73 47.95% GTT 34
    tRNA-Cys L 5 346 5 411 66 46.97% GCA 1
    tRNA-Tyr L 5 413 5 483 71 59.15% GTA 1
    COXI H 5 485 7 035 1 551 43.39% 516 GTG TAA 0
    tRNA-Ser L 7 036 7 106 71 49.30% TGA 3
    tRNA-Asp H 7 110 7 181 72 36.11% GTC 13
    COXII H 7 195 7 885 691 42.84% 230 ATG T 0
    tRNA-Lys H 7 886 7 961 76 46.05% TTT 1
    ATP8 H 7 963 8 127 165 38.79% 54 ATG TAA −7
    ATP6 H 8 121 8 804 684 40.20% 227 ATG TAA −1
    COXIII H 8 804 9 589 786 44.53% 261 ATG TAA −1
    tRNA-Gly H 9 589 9 660 72 36.11% TCC 0
    ND3 H 9 661 10 011 351 44.16% 116 ATG TAG −2
    tRNA-Arg H 10 010 10 079 70 47.14% TCG 0
    ND4L H 10 080 10 376 297 45.45% 98 ATG TAA −7
    ND4 H 10 370 11 750 1 381 41.20% 460 ATG T 0
    tRNA-His H 11 751 11 819 69 30.43% GTG 0
    tRNA-Ser H 11 820 11 888 69 36.23% GCT 1
    tRNA-Leu H 11 890 11 962 73 43.84% TAG 3
    ND5 H 11 966 13 789 1 824 40.79% 607 ATG TAA −4
    ND6 L 13 786 14 307 522 44.83% 173 ATG TAG 0
    tRNA-Glu L 14 308 14 376 69 39.13% TTC 4
    Cytb H 14 381 15 521 1 141 41.02% 380 ATG T 0
    tRNA-Thr H 15 522 15 593 72 51.39% TGT −1
    tRNA-Pro L 15 593 15 662 70 41.43% TGG 0
    D-loop H 15 663 16 599 937 33.19% 0
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    表  5  偏好密码子RSCU值

    Table  5.   RSCUs for preference codons in 3 species of S. obscures

    氨基酸 Amino acid密码子 Codon云南暗色唇鲮 YN贵州暗色唇鲮 GZ广西暗色唇鲮 GX
    数量 Number使用频率 RSCU数量 Number使用频率 RSCU数量 Number使用频率 RSCU
    Arg CGA 52 2.737 51 2.684 52 2.737
    Gly GGA 126 2.049 125 2.033 125 2.033
    Leu CTA 248 2.400 249 2.414 249 2.414
    Pro CCA 121 2.283 120 2.264 119 2.256
    Ser TCA 82 2.103 83 2.128 83 2.119
    Stp TAA 7 2.800 7 2.800 7 2.800
    下载: 导出CSV
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出版历程
  • 收稿日期:  2019-11-15
  • 修回日期:  2020-01-07
  • 刊出日期:  2020-02-01

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