Isolation and Identification of Duck Plague Virus and Sequence Analysis on Its UL2 and TK Genes
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摘要: 2015年，福建省福州地区2个鸭场（M18肉鸭场及蛋鸭场）发生大量鸭死亡，初诊疑似鸭瘟。为明确其病原，分别采集病死鸭肝脏、食道样品进行鸭瘟病毒特异性PCR检测和病毒分离，对获得的2株病毒分离株分别进行鸭已知病原的检测，确定均为鸭瘟病毒。对新分离鉴定的2株鸭瘟病毒株的UL2基因进行序列测定及分析发现，均具有强毒株的分子特征；经TK基因序列测定及分析表明，2株新分离的鸭瘟病毒株与强毒代表株、弱毒疫苗株的TK基因核苷酸同源性均高达98.7%。Abstract: In March 2015, massive deaths happened to the M18 Duck Farm and an egg-laying duck farm in Fuzhou. It was suspected of an outbreak of duck plaque. Samples of liver and esophagus from the dead birds were collected for pathogenic identification using PCR and virus isolation. Two strains with virulent characteristics were thus identified. Subsequently, a sequence analysis on their UL2 genes further confirmed the classification. In addition, the TK gene sequences of the two isolated virus strains showed a nucleotide homology of 98.7% with those of the common virulent strain as well as the vaccine strain.
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Key words:
- virulent duck plague virus /
- isolation and identification /
- UL2 gene /
- TK gene /
- sequence analysis
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图 1 临床采集样品的PCR检测
注：M为DNA 2000 Marker；1为阳性对照；2为阴性对照；3为病死麻鸭食道样品；4为病死M18肉鸭食道样品；5为病死麻鸭肝脏样品；6为病死M18肉鸭肝脏样品；7为鸭流感病毒；8为鸭1型副粘病毒；9为鸭细小病毒；10为鸭坦布苏病毒；11为鸭甲肝病毒；12为鸭呼肠孤病毒；13为鸭圆环病毒；14为鸭疫里默氏菌；15为鸭致病性大肠杆菌；16为鸭沙门氏菌。
Figure 1. PCR detection on clinical samples
图 2 分离病毒的PCR检测
注：M为DNA 2000 Marker；1为阳性对照；2为阴性对照；3为FJ-1501；4为FJ-1502；5为鸭流感病毒；6为鸭1型副粘病毒；7为鸭细小病毒；8为鸭坦布苏病毒；9为鸭甲肝病毒；10为鸭呼肠孤病毒；11为鸭圆环病毒；12为鸭疫里默氏菌；13为鸭致病性大肠杆菌；14为鸭沙门氏菌。
Figure 2. PCR detection of isolated viruses
图 3 鸭瘟病毒UL2基因的扩增
注：M为DNA 2000 Marker；1为阴性对照；2为FJ-1501；3为FJ-1502；4为A公司鸭瘟弱毒疫苗；5为B公司鸭瘟弱毒疫苗。
Figure 3. Amplification of DPV UL2 gene
图 5 鸭瘟病毒TK基因的扩增
注：M为DNA 2000 Marker；1为阳性对照；2为阴性对照；3为FJ-1501；4为FJ-1502；5为A公司鸭瘟弱毒疫苗；6为B公司鸭瘟弱毒疫苗。
Figure 5. Amplification of DPV TK gene
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