水稻稻曲病菌的分离鉴定及室内毒力测定

胡贤锋; 李荣玉; 王健; 李明; 李思博; 黄永会; 吴帅; 赵琪君

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2017.06.012

水稻稻曲病菌的分离鉴定及室内毒力测定

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2017.06.012

胡贤锋^{1, 2,},
李荣玉^{1, 2, 3},
王健^{1, 2},
李明^{1, 3, ,},
李思博⁴,
黄永会^{1, 2},
吴帅^{1, 2},
赵琪君^{1, 2}

1.
贵州大学作物保护研究所, 贵州贵阳 550025
2.
贵州大学农学院, 贵州贵阳 550025
3.
贵州省山地农业病虫害重点实验室, 贵州贵阳 550025
4.
沈阳农业大学植物保护学院, 辽宁沈阳 110161

基金项目:

国家重点研发计划项目 2016YFD0200500

国家公益性行业（农业）科研专项 201503107

贵州省科技支撑计划项目黔科合支撑[2016]2534号

贵州大学引进人才科研项目贵大人基合字（2015）07号

大学生创新创业训练计划项目贵大（省）创字2016（026）

详细信息

作者简介:
胡贤锋(1993-), 男, 硕士研究生, 研究方向:农产品质量安全研究(E-mail:1418083255@qq.com)

通讯作者:
李明(1959-), 男, 博士, 教授, 博士生导师, 研究方向:农产品质量安全、植物源农药及其毒理(E-mail:lm21959@163.com)

中图分类号: S435
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出版历程
- 收稿日期: 2017-03-22
- 修回日期: 2017-05-10
- 刊出日期: 2017-06-28

Isolation, Identification and Fungicide Toxicity of Ustilaginoidea virens

HU Xian-feng^{1, 2
,},
LI Rong-yu^{1, 2, 3},
WANG Jian^{1, 2},
LI Ming^{1, 3
, ,},
LI Si-bo⁴,
HUANG Yong-hui^{1, 2},
WU Shuai^{1, 2},
ZHAO Qi-jun^{1, 2}

1.
Institute of Crop Protection, Guizhou University, Guiyang, Guizhou 550025, China
2.
College of Agriculture, Guizhou University, Guiyang, Guizhou 550025, China
3.
The Provincial Key Laboratory for Agricultural Pest Management in Mountainous Region, Guiyang, Guizhou 550025, China
4.
College of Plant Protection, Shenyang Agricultural University, Shenyang, Liaoning 110161, China

摘要

摘要: 为优化稻绿核菌的分离方法，筛选防控稻曲病的有效药剂，采用孢子敲落法和火焰灼烧法分别分离不同成熟度的稻曲球，从形态学、致病性、rDNA-ITS序列等方面对HP-7菌株进行鉴定，并通过菌丝生长抑制法测定了HP-7菌株对7种杀菌剂的敏感性。结果表明，采用孢子敲落法分离鲜黄色稻曲球成功率最高，达98.33%，将HP-7菌株的rDNA-ITS序列在NCBI上进行BLAST比对，菌株HP-7与稻绿核菌相似度达99%，结合形态学特征分析确定HP-7为稻绿核菌。离体试验表明，戊唑醇和嘧菌酯对稻绿核菌的菌丝生长抑制作用最强，其EC₅₀值分别为0.109 1、0.158 5 mg·L^-1。其结果可为稻绿核菌的分离鉴定及稻曲病防控提供理论参考。
- 稻曲病 /
- 稻绿核菌 /
- 分离鉴定 /
- 室内毒力
Abstract: Two methods for isolating HP-7 (Ustilaginoidea virens) and 7 fungicides for controlling the false smut disease on rice caused by the pathogen were compared. Fungal spores at different maturation stages were separated by means of shaking or flame burning. HP-7 was verified by its morphology, pathogenicity, and rDNA-ITS sequences. The sensitivity of HP-7 toward and toxicity on the fungi by the fungicides were determined based on the fungal mycelium growth under treatment. It was found that the successful rate in separating the fresh yellow chiamydospores by shaking was up to 98.33%, which was better than the flaming method. The rDNA-ITS sequences of HP-7 were submitted to NCBI for a BLAST analysis that showed a 99% homogeny with U. virens. Combining that result with the morphological observations, HP-7 was verified to be the pathogen that caused the rice false smut. Among the fungicides tested, tebuconazole and azoxystrobin exhibited the highest inhibition rates on HP-7, with EC₅₀ at 0.109 1 and 0.158 5 mg·L^-1, respectively. It appeared that an effective spore separation method was identified, and the positive identification and appropriate selection on fungicide for effective control of the false smut disease on rice crops were obtained.
- rice false smut /
- Ustilaginoidea virens /
- identification /
- laboratory toxicity test

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图 1 稻绿核菌的菌落形态

注：A为正面，B为背面。

Figure 1. Colony morphology of U. virens

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图 2 稻绿核菌的菌丝(A)和厚坦孢子(B)

Figure 2. Hypha (A) and chlamydospore (B) of U. virens

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图 3 稻曲病的发病症状

注：A、B、C分别为鲜黄色、黄绿色和墨绿色稻曲球。

Figure 3. Symptom of false smut disease on rice

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图 4 稻绿核菌rDNA-ITS序列PCR扩增产物

Figure 4. rDNA-ITS PCR amplified products of U. virens

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图 5 HP-7菌株基于rDNA-ITS序列的系统发育树

Figure 5. Phylogenetic tree based on rDNA-ITS sequences of HP-7 strain

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表 1 2种分离方法分离不同成熟度的稻曲球的分离效果

Table 1. Two methods for separating rice smut spores at different maturation stages

分离方法	稻曲球	分离成功率/%	分离成功率/%	分离成功率/%	平均成功率/%
孢子敲落法	鲜黄色	95	100	100	98.33
	黄绿色	5	0	0	1.66
	墨绿色	0	0	0	0
火焰灼烧法	鲜黄色	70	55	65	63.33
	黄绿色	40	35	20	31.66
	墨绿色	0	5	10	5

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表 2 7种杀菌剂对绿核菌的室内毒力

Table 2. Laboratory toxicity determination on 7 fungicides against U. virens

药剂	供试药剂质量浓度 /(mg·L^-1)					毒力回归方程(y)	相关系数 (r)	EC₅₀/ (mg·L^-1)
戊唑醇	0.5	0.25	0.125	0.0625	0.03125	y=6.9689+2.0454x	0.9644	0.1091
井冈霉素	200	100	50	25	12.5	y=2.5989+1.4157x	0.9896	49.6773
苯醚甲环唑	1.6	0.8	0.4	0.2	0.1	y=6.4634+2.1397x	0.9849	0.2071
甲基硫菌灵	0.8	0.4	0.2	0.1	0.05	y=4.6507+1.0272x	0.9852	2.1881
嘧菌酯	2	1	0.5	0.25	0.125	y=6.9368+2.4213x	0.9974	0.1585
己唑醇	2	1	0.5	0.25	0.125	y=6.4263+2.5744x	0.9973	0.2792
多菌灵	1.6	0.8	0.4	0.2	0.1	y=5.0768+1.9426x	0.9816	0.9137

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参考文献(14)

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