秋石斛离体快速繁殖技术研究

叶秀仙; 林榕燕; 陈艺荃; 林兵; 钟淮钦

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2017.08.013

秋石斛离体快速繁殖技术研究

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2017.08.013

叶秀仙^{1, 2, 3,},
林榕燕^{1, 2, 3},
陈艺荃⁴,
林兵^{1, 2, 3},
钟淮钦^{1, 2, 3, ,}

1.
福建省农业科学院作物研究所, 福建福州 350013
2.
福建省农业科学院花卉研究中心, 福建福州 350013
3.
福建省特色花卉工程技术研究中心, 福建福州 350013
4.
福建省农业科学院农业工程技术研究所, 福建福州 350003

基金项目:

福建省科技计划项目——省属公益科研院所基本科研专项 2015R1026-8

福建省财政专项——福建省农科院科技创新团队PI项目 2016PI-39

福建省农业科学院导师制基金项目 2014QA-5

详细信息

作者简介:
叶秀仙(1977-), 女, 副研究员, 主要从事花卉育种与组织培养技术研究(E-mail:yxx7861@163.com)

通讯作者:
钟淮钦(1979-), 男, 副研究员, 主要从事观赏植物种质资源评价与生物技术研究(E-mail:zhqeeast@163.com)

中图分类号: S68
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出版历程
- 收稿日期: 2017-02-12
- 修回日期: 2017-06-14
- 刊出日期: 2017-08-28

Rapid Propagation of Dendrobium spp. Using Tissue Culture

YE Xiu-xian^{1, 2, 3
,},
LIN Rong-yan^{1, 2, 3},
CHEN Yi-Quan⁴,
LIN Bing^{1, 2, 3},
ZHONG Huai-qin^{1, 2, 3
, ,}

1.
Institute of Crop Sciences, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou, Fujian 350013, China
2.
Flowers Research Center, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou, Fujian 350013, China
3.
Fujian Engineering Research Center for Characteristic Floriculture, Fuzhou, Fujian 350013, China
4.
Institute of Agricultural Engineering and Technology, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou, Fujian 350003, China

摘要

摘要: 以秋石斛‘三亚阳光’幼芽为外植体，采用丛生芽诱导途径，并利用正交设计法，探讨基本培养基（花宝1号、改良1#、改良2#、改良3#）、植物生长调节剂（6-BA、NAA、IBA）、白糖等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响，以期建立秋石斛‘三亚阳光’丛生芽组培快繁技术。结果表明：各试验因素对秋石斛丛生芽增殖影响的主次关系为基本培养基＞6-BA＞NAA＞白糖；筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良2#+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+白糖30.0 g·L^-1+琼脂粉3.0 g·L^-1+卡拉胶3.0 g·L^-1，50 d平均增殖系数达6.25；筛选出适宜生根的培养基配方为改良3#+NAA 0.3 mg·L^-1+IBA 0.5 mg·L^-1+活性炭0.5 g·L^-1+香蕉泥100.0 g·L^-1+白糖20 g·L^-1+琼脂粉3.6 g·L^-1+卡拉胶3.6 g·L^-1，生根率为100.0%；试管苗移栽60d成活率达96.5%。
- 秋石斛 /
- 丛生芽 /
- 正交设计 /
- 组织培养
Abstract: Newly geminated buds of Dendrobium spp., Sanya Sunny, were used asexplants to induce bud clumps. Effects of culture media (i.e., Hyponex #1, Improvement #1, Improvement #2, and Improvement #3), phytohormones (i.e., 6-BA, NAA, and IBA), and sugar on the bud clump induction, propagation, and rooting of the plantlets were analyzed and optimized using anorthogonal experiment. The results showed that the major factors affecting the bud multiplication were medium, 6-BA, NAA, and sugar. Improvement #2 medium that contained 1.0 mg·L^-1 of 6-BA, 0.2 mg·L^-1 of NAA, 30.0 g·L^-1 of sugar, 3.0 g·L^-1 of agar powder and 3.6 g·L^-1 of carrageenanprovided the best average propagation coefficient of 6.25 in 50 d among all tested media. For rooting, Improvement #3 with added NAA at 0.3 mg·L^-1, IBA at 0.3 mg·L^-1, AC at 0.5 g·L^-1, banana puree at 100.0 g·L^-1, sugar at 20.0 g·L^-1, agar powder at 3.6 g·L^-1 and carrageenan at 3.6 g·L^-1 performed best with a 100.0% rooting rate. The survival rate of the plantlets in 60 d after transplanting from test tubes was 96.5%.
- Dendrobium spp. /
- bud clumps /
- orthogonal design /
- tissue culture

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图 1 丛生芽大量增殖

Figure 1. Propagated bud clumps

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图 2 生根培养75 d时生长表现

Figure 2. Rooting performance after 75 d

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图 3 温室驯化炼苗

Figure 3. Greenhouse acclimations

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图 4 4.5 cm育苗杯种植

Figure 4. Planting in seedling cups

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图 5 移栽种植6个月时生长表现情况

Figure 5. Growth performance of plants 6 months after repotting

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图 6 移栽种植12个月时生长表现情况

Figure 6. Growth performance of plants 12 months after repotting

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表 1 L9 (4³)因素及水平

Table 1. Factors and levels of orthogonal design L₉ (4³)

编号	基本培养基	6-BA/ (mg·L^-1)	NAA/ (mg·L^-1)	白糖/ (g·L^-1)
1	花宝1号	1.0	0.05	20.0
2	改良1#	2.0	0.1	30.0
3	改良2#	3.0	0.2	40.0
注：花宝1号用量3.0 g·L^-1。

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表 2 L9 (3⁴)正交试验设计与极差分析结果

Table 2. Result of orthogonal experiment L9 (3⁴)

处理	因素				丛生芽平均增殖系数
处理	A	B	C	D	丛生芽平均增殖系数
1	花宝1号	1.0	0.05	20	1.69
2	花宝1号	2.0	0.10	30	1.45
3	花宝1号	3.0	0.20	40	1.39
4	改良1#	1.0	0.10	40	3.71
5	改良1#	2.0	0.20	20	4.30
6	改良1#	3.0	0.05	30	3.28
7	改良2#	1.0	0.20	30	6.25
8	改良2#	2.0	0.05	40	5.07
9	改良2#	3.0	0.10	20	4.43
k1	1.510	3.883	3.347	3.473
k2	3.763	3.607	3.197	3.660
k3	5.250	3.033	3.980	3.390
极差R	3.740	0.850	0.783	0.270
主次顺序		A＞B＞C＞D
优水平	A3	B1	C3	D2
优组合		A3 B1 C3 D2

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表 3 丛生芽增殖系数方差分析结果

Table 3. Variance analysison propagation rate

因素	SS	df	F	F_0.05	显著性	F_0.10	显著性
基本培养基	21.275	2	185.000	19.000	^*	9.000	^*
6-BA	1.128	2	9.809	19.000		9.000	^*
NAA	1.037	2	9.017	19.000		9.000	^*
白糖	0.115	2	1.000	19.000		9.000
误差	0.12	2

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表 4 不同用量NAA和IBA对试管苗生根培养的影响

Table 4. Effect of NAA and IBA in varied concentrations on rooting ofplantlets in test tubes

处理	NAA+ IBA/ (mg·L^-1)	接种株数 /株	生根株数 /株	生根率 /%	诱导生根情况
1	0.1+0.1	125	108	86.4 d	21 d左右开始生根，平均生根数1.6条，平均根长1.5 m，根较细弱
2	0.1+0.3	125	119	95.2 b	14 d左右开始生根，平均生根数4.8条，平均根长2.3 cm，根细弱
3	0.3+0.3	125	125	100.0 a	10 d左右开始生根，平均生根数6.1条，平均根长2.6 cm，根粗壮，呈放射状
4	0.5+0.5	125	125	100.0 a	10 d左右开始生根，平均生根数5.2条，平均根长1.8 cm，根较粗壮，呈放射状
5	0+0.5	125	125	100.0 a	10 d左右开始生根，平均生根数5.3条，平均根长2.4 cm，根较粗壮，呈放射状
6	0.5+0	125	116	92.8 bc	14 d左右开始生根，平均生根数4.5条，平均根长2.2cm，根细弱
注：LSD测验，不同字母表示P＜0.05显著性差异。

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参考文献(6)

[1]	黄志明, 林庆良, 佘慧敏.蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术的研究[J].莆田学院学报, 2002, 9(3):22-26. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-PTGZ200203006.htm
[2]	罗岚.秋石解原球茎增殖培养[J].花木盆景, 2003, 6(8):4-7. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-NCSY200903019.htm
[3]	罗岚, 关仕港, 刘建昌, 等.秋石解兰离体快速繁殖研究[J].佛山科学技术学院学报:自然科学版, 2004, 22(2):69-71. http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?filename=fsdx200402019&dbname=CJFD&dbcode=CJFQ
[4]	陈亚鸿, 洪磊, 陈雄庭.减少秋石斛在组织培养中的褐化研究[J].现代农业科学, 2009, 16(3):44-48. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-NCSY200903019.htm
[5]	叶秀仙, 黄敏玲, 罗远华, 等.盆花文心兰组培快繁技术研究[J].福建农业学报, 2016, 31(11):1198-1203. http://www.fjnyxb.cn/CN/abstract/abstract3056.shtml
[6]	盖均镒.试验统计方法[M].北京:中国农业出版社, 2000:382-383.