花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

叶秀仙; 陈艺荃; 钟淮钦; 林榕燕; 黄敏玲

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2018.03.008

花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2018.03.008

叶秀仙^{1, 2,},
陈艺荃³,
钟淮钦^{1, 2},
林榕燕^{1, 2},
黄敏玲^{1, 2, ,}

1.
福建省农业科学院作物研究所, 福建福州 350013
2.
福建省农业科学院花卉研究中心, 福建福州 350013
3.
福建省农业科学院农业工程技术研究所, 福建福州 350013

基金项目:

福建省农业科学院创新团队建设项目 STIT2017-2-9

福建省农业科学院生产性工程化实验室项目 2014GCH-11

详细信息

作者简介:
叶秀仙(1977-), 女, 副研究员, 主要从事花卉育种与组织培养技术研究(E-mail:yxx7861@163.com)

通讯作者:
黄敏玲(1960-), 女, 研究员, 主要从事花卉品种选育与生物技术研究(E-mail:huangml618@163.com)

中图分类号: S68
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出版历程
- 收稿日期: 2017-11-15
- 修回日期: 2018-01-05
- 刊出日期: 2018-03-01

Induction Plant Regeneration with Stem Segments of Anoectochilus roxburghii (wall.) lindl. Huaye

YE Xiu-xian^{1, 2
,},
CHEN Yi-quan³,
ZHONG Huai-qin^{1, 2},
LIN Rong-yan^{1, 2},
HUANG Min-ling^{1, 2
, ,}

1.
Institute of Crop Sciences, Fujian Academy of Agricultural Science, Flowers Research Center, Fuzhou, Fujian 350013, China
2.
Flouer Research Center, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou, Fujian 350013, China
3.
Institute of Agricultural Engineering Technology, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou, Fujian 350013, China

摘要

摘要: 以花叶金线莲茎段为外植体，采用正交设计，探讨基本培养基（MS、B₅、改良MS）、植物生长调节剂（TDZ、6-BA、KT、IBA）等对其茎段诱导、增殖及生根等关键环节的影响，以期建立花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术。结果表明：各试验因素对花叶金线莲茎段诱导丛生芽影响的主次关系为基本培养基>KT>6-BA>TDZ；筛选出适宜的增殖培养基配方为改良MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+KT 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+白糖30.0 g·L^-1+琼脂粉3.0 g·L^-1+卡拉胶3.0 g·L^-1，60 d平均增殖系数达4.58；筛选出适宜生根的培养基配方为改良MS+IBA 0.3 mg·L^-1+活性炭0.5 g·L^-1+白糖20 g·L^-1+琼脂粉3.6 g·L^-1+卡拉胶3.6 g·L^-1，培养60 d，生根率为100.0%。
- 花叶金线莲 /
- 丛生芽 /
- 正交设计 /
- 组织培养
Abstract: Stem segments of Anoectochilus roxburghii (wall.) lindl. Huaye were used as the explants to induce bud clumps. Varied medium (i.e., MS, B₅ or improved MS) and phytohormone (i.e., TDZ, 6-BA, KT or IBA) were applied for the tissue regeneration experiment of an orthogonal design. It was found the major factors affecting the bud multiplication to be basal medium, KT, 6-BA and TDZ. The optimal multiplication was achieved by using the improved MS+6-BA with additions of 2.0 mg·L^-1+KT 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+sugar 30.0 g·L^-1+agar powder 3.0 g·L^-1, and carrageenan 3.6 g·L^-1. An averaged propagation coefficient of 4.58 in 60 days was obtained. For rooting, the improved MS+6-BA with added 0.3 mg ·L^-1+AC 0.5 g·L^-1+sugar 20.0 g·L^-1+agar powder 3.6 g·L^-1 and carrageenan 3.6 g·L^-1, rendered a 100.0% rate in 60 days.
- Anoectochilus roxburghii (wall.) lindl. Huaye /
- bud clumps /
- orthogonal design /
- tissue culture

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图 1 母株材料选取与外植体

Figure 1. Selection of mother plant material for explant

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图 2 丛生芽大量增殖

Figure 2. Scale-up bud clumps propagation

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图 3 生根培养60 d时生长表现

Figure 3. Rooting performance in 60 days

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图 4 5 cm育苗杯种植

Figure 4. Planting seedlings in cup

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图 5 穴盘种植

Figure 5. Planting seedlings on tray

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表 1 L9 ((3⁴)因素及水平

Table 1. Orthogonal design L9 (3⁴) factors and levels

编号	A：基本培养基	B：TDZ/(mg·L^-1)	C：6-BA/(mg·L^-1)	D：KT/(mg·L^-1)
1	MS	0	0	0
2	B₅	0.1	1.0	0.5
3	改良MS	0.5	2.0	1.0

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表 2 L9 (3⁴)正交试验设计与极差分析结果

Table 2. L9 (3⁴) design and result of orthogonal experiment

处理	因素				平均增殖系数
处理	A	B	C	D	平均增殖系数
1	MS	0	0	0	2.65
2	MS	0.1	1.0	0.5	2.96
3	MS	0.5	2.0	1.0	3.14
4	B₅	0	1.0	1.0	4.08
5	B₅	0.1	2.0	0	3.98
6	B₅	0.5	0	0.5	4.18
7	改良MS	0	2.0	0.5	4.58
8	改良MS	0.1	0	1.0	4.19
9	改良MS	0.5	1.0	0	3.66
k1	2.917	3.770	3.673	3.430
k2	4.080	3.710	3.567	3.907
k3	4.143	3.660	3.900	3.803
极差R	1.226	0.110	0.333	0.477
主次顺序		A > D > C > B
优水平	A3	B1	C3	D2
优组合		A3 B1 C3 D2

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表 3 丛生芽增殖系数方差分析结果

Table 3. Analysis of variance on propagation rates

因素	SS	df	F	F_0.05	显著性	F_0.01	显著性
A：基本培养基	2.862	2	159.000	19.000	*	9.000	*
B：TDZ	0.018	2	1.000	19.000		9.000
C：6-BA	0.174	2	9.667	19.000		9.000	*
D：KT	0.377	2	20.944	19.000	*	9.000	*
误差	0.02	2

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表 4 不同浓度的IBA对试管苗生根培养的影响

Table 4. Effect of IBA concentration on rooting of test-tube plantlets

处理	IBA/(mg·L^-1)	接种株数/株	生根株数/株	生根率/%	诱导生根情况
1	0.1	125	102	81.6 b	21 d左右开始生根，平均生根数1.6条，平均根长1.3 m，根较细弱
2	0.3	125	125	100.0 a	14 d左右开始生根，平均生根数3.3条，平均根长2.3 cm，根粗壮
3	0.5	125	125	100.0 a	14 d左右开始生根，平均生根数3.1条，平均根长2.2 cm，根粗壮
4	1.0	125	125	100.0 a	21 d左右开始生根，平均生根数1.6条，平均根长1.5 cm，根较细弱
注：同列数据后不同小写字母表示经LSD测验，差异达显著水平(P < 0.05)。

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参考文献(9)

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