鸭病毒性肝炎一般表现为肝脏肿大出血^{[1, 2, 3, 4, 5, 6]}。2005年法国学者Guérin等自表现胰腺炎的番鸭中分离到鸭1型甲肝病毒，剖检发病鸭肝脏和肾脏无明显肿大出血病变^[7]，从而引起对DHAV-1致病性的关注。自2011年9月以来，我国福建、浙江、上海、广东等地相继出现10~30日龄雏番鸭、半番鸭以胰腺发黄、出血(俗称胰腺炎)为特征的疫病，其发病率为10%~30%，病死率达25%~40%。本课题组对患该病的雏番鸭病例开展了病原学研究，并对分离病毒进行蚀斑纯化、血清中和试验、基因组测序与分析、红细胞凝集试验和动物致病性试验等一系列相关研究，结果显示该病毒对鸡红细胞、鸭红细胞、绵羊红细胞的无血凝活性，可被鸭1型甲肝病毒高免血清部分中和^[8]；核苷酸序列与鸭1型甲肝病毒同源性较高^[9]，与鸭1型甲肝病毒相关，但剖检病死雏番鸭表现为胰腺发黄出血、坏死，肝脏稍肿大，未见明显出血^[10]；这与经典的鸭1型甲肝病毒所致的特征病变病死鸭表现角弓反张、肝脏肿大出血和肾脏肿大出血等^{[1, 2]}明显不同。鉴于该病毒主要引起胰腺病变，将分离毒暂定名为胰腺型鸭1型甲肝病毒^{[8, 9, 10]}。

为了进一步掌握雏番鸭感染胰腺型鸭1型甲肝病毒后的组织病理学变化特征，用本课题组分离、鉴定和保存的胰腺型鸭1型甲肝病毒MPZJ1206株感染10日龄半番鸭，剖检病死鸭、取样、固定、切片，观察其临床眼观病变和显微病理变化，以期为研究其发病机制、病理学诊断提供科学依据。

胰腺型鸭1型甲肝病毒MPZJ1206株由本课题组分离、鉴定和保存，ELD₅₀为4.68Log₁₀ELD₅₀·mL^-1。

购进7日龄健康的雏半番鸭31只，经检测DHAV-1抗体为阴性，饲养至10 d，随机分为2组，对照组10只，试验组21只。试验组接种胰腺型鸭1型甲肝病毒MPZJ1206，腿部肌肉接种病毒量为10⁵ELD₅₀·羽^-1，对照组雏半番鸭腿部肌肉注射无菌PBS缓冲液。两组动物进行隔离饲养，每天观察各组试验鸭的临床症状，剖检病死鸭观察各器官的肉眼变化及显微病理变化，并采集鸭肝脏、胰腺、脾脏和肾脏等进行病毒的再鉴定。

攻毒后发病致死鸭立即剖检，观察临床眼观病变；同时取对照组雏鸭快速处死后与发病致死鸭一样采集心、肝、脾、肺、肾、胰腺、胸腺、法氏囊、肌胃、腺胃、小肠和脑等组织，以10%中性福尔马林液固定，经乙醇脱水、二甲苯透明、常规石蜡包埋，然后切片5 μm，H.E染色，观察其组织显微病理变化。

采集病死鸭的肝脏、胰腺、脾脏和肾脏等组织经RT-PCR鉴定为DHAV-1阳性，对照组鸭肝脏、胰腺、脾脏和肾脏等经RT-PCR鉴定为DHAV-1阴性。

攻毒后2 d试验组鸭开始出现精神沉郁，食欲下降；攻毒后4 d开始出现零星死亡，死亡时未表现典型的角弓反张临床症状，发病率为71.4%(15/21)，死亡率为38.1%(8/21)。6 d耐过后逐渐恢复正常。

死亡后剖检发现胰腺出血和泛黄，肝脏未见明显出血，肾脏有轻微水肿。

病死鸭胰腺呈坏死性胰腺炎，胰腺上皮大面积坏死，细胞呈颗粒状变性、坏死，组织结构疏松，管腔内有多量的血红蛋白，分泌减少，坏死区域看不到血管结构，伴有淋巴细胞浸润 (图1)。2.4.2 肝脏 肝细胞局灶性变性，嗜碱性细胞增多。小叶间有少量淋巴细胞浸润、肝索变宽、肝血窦狭窄。叶间小静脉血管周围有淋巴细胞和肝细胞形成规则的腺管状结构，发现有少量肝细胞凋亡。攻毒后5 d死亡的病死鸭肝脏有大量肝细胞呈纤维素性坏死，窦状隙红细胞数量增多，伴有炎性细胞浸润 (图2)。

图1(Fig.1)

图1 胰腺的病理变化 Fig.1 The histopathologic changes in pancreas 注：A为胰腺坏死灶(上皮细胞颗粒变性、坏死)(×400)； B为淋巴细胞浸润(×400)。

图2(Fig.2)

图2 肝脏的病理变化(H.E) Fig.2 The histopathologic changes in liver 注：A为肝细胞纤维素性坏死(×400)； B为小静脉血管周围淋巴细胞和肝细胞形成腺管状结构、肝细胞凋亡(×400)。

脾脏可见坏死灶，白髓淋巴细胞明显数量减少、细胞间距增宽、网状细胞肿胀、增生，可见核固缩、碎裂及核内包涵体，异嗜性白细胞浸润，脾小体结构模糊不清，脾窦轻度充血 (图3)。

图3(Fig.3)

图3 脾脏的病理变化(H.E) Fig.3 The histopathologic changes in spleen 注：A为脾脏淋巴细胞减少(×100)； B为脾脏白髓淋巴细胞减少、异嗜性白细胞浸润(×400)。

肾小管上皮细胞结构疏松、呈水泡变性，细胞明显肿胀、胞浆染色明显变淡、出现空泡，管腔狭窄甚至消失；肾小球变化不明显 (图4)。2.4.5 脑部 脑组织结构疏松、水肿、出现零星坏死灶，血管扩张轻度充血，伴有炎性细胞浸润，大量神经细胞空泡变性坏死 (图5)。

图4(Fig.4)

图4 肾脏的病理变化(H.E) Fig.4 The histopathologic changes in kidney 注：A为肾小管上皮细胞水泡变性(×400)； B为肾小管上皮细胞水泡变性(×400)。

图5(Fig.5)

图5 大脑的病理变化(H.E) Fig.5 The histopathologic changes in cerebrum 注：A为大脑坏死病灶(×400)； B为神经细胞坏死(×400)。

肌纤维间水肿，间质增宽，心肌纤维变性，细胞发生颗粒变性或水泡变性。2.4.7 胸腺 胸腺组织中出现数量不等的散在局灶性坏死灶，坏死灶内细胞崩解消失。

法氏囊中部分淋巴滤泡发生坏死，以髓质坏死最明显，淋巴细胞核碎裂、崩解。 2.4.9 小肠 小肠黏膜上皮及腺上皮有少量脱落，肠壁变薄，十二指肠上皮大量脱落，腺上皮与基底膜脱离，肠腔内有大量的脱落上皮；肌层水肿。

肺偶见出血、水肿，间质增宽。2.4.11 肌胃 肌层水肿，纤维束间充满水肿液。

腺胃黏膜坏死、脱落，间质瘀血或出血；黏膜下纤维组织和淋巴细胞增生见黏膜上皮细胞增生和间质纤维组织增生。

对照组鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰腺、胸腺、法氏囊、肌胃、腺胃、小肠和脑等组织显微正常。

一般而言，典型的鸭病毒性肝炎可引起雏鸭快速死亡，发病率、死亡率高^{[11, 12, 13, 14, 15]}。本研究胰腺型鸭1型甲肝病毒致死雏半番鸭的病程较长，临床剖检发现胰腺型鸭1型甲肝病毒感染雏半番鸭的特征病变为胰腺出血、发黄，肝脏未见明显肉眼病变，这与经典鸭1型甲肝病毒感染后出现的角弓反张，肝脏肿大、出血，肾脏肿大、出血特征存在明显的差异^{[1, 2, 11, 12, 13, 14, 15]}。因此，胰腺和肝脏的大体病变可有效地对经典型和胰腺型鸭肝炎进行鉴别诊断。

从本研究组织显微病理结果发现，胰腺型鸭1型甲肝病毒对雏半番鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰腺、胸腺、法氏囊、腺胃、小肠和脑等组织器官都有不同程度的损害，其中以胰腺损害最为严重。病死鸭胰腺呈坏死性胰腺炎，胰腺上皮大面积坏死，细胞呈颗粒状变性、坏死，组织结构疏松，管腔内有大量的血红蛋白，分泌减少，坏死区域看不到血管结构，伴有淋巴细胞浸润；比祁保民等^{[11, 12, 13, 14, 15]}报道的胰腺组织病变更严重。肝脏呈局灶性变性，大量肝细胞呈纤维素性坏死，窦状隙红细胞数量增多，伴有炎性细胞浸润，未见到出血。这与祁保民等报道的肝脏组织病变略有不同^{[11, 12, 13, 14, 15]}，可能在于二者感染后病程时序有所差异，或者2种病毒对细胞蛋白的嗜性不同，究其原因有待这一步研究加以明确。