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花粉管通道法转EPSPS基因创制耐草甘膦玉米种质

李向龙 郑登俞 张春 张中保 吴忠义

李向龙,郑登俞,张春,等. 花粉管通道法转EPSPS基因创制耐草甘膦玉米种质 [J]. 福建农业学报,2023,38(5):524−529 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2023.05.002
引用本文: 李向龙,郑登俞,张春,等. 花粉管通道法转EPSPS基因创制耐草甘膦玉米种质 [J]. 福建农业学报,2023,38(5):524−529 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2023.05.002
LI X L, ZHENG D Y, ZHANG C, et al. Glyphosate-tolerant Maize Plants Generated by Pollen Tube Pathway Method [J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences,2023,38(5):524−529 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2023.05.002
Citation: LI X L, ZHENG D Y, ZHANG C, et al. Glyphosate-tolerant Maize Plants Generated by Pollen Tube Pathway Method [J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences,2023,38(5):524−529 doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2023.05.002

花粉管通道法转EPSPS基因创制耐草甘膦玉米种质

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2023.05.002
基金项目: 北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20230603)
详细信息
    作者简介:

    李向龙(1981−),男,硕士,助理研究员,主要从事玉米分子育种研究(E-mail:lixianglong2004@sina.com

    通讯作者:

    吴忠义(1969−),男,博士,研究员,主要从事玉米分子育种研究(E-mail:zwu@126.com

  • 中图分类号: S513

Glyphosate-tolerant Maize Plants Generated by Pollen Tube Pathway Method

  • 摘要:   目的  对T0-T3代转基因植株进行抗草甘膦EPSPS基因的筛选检测,以期得到遗传稳定的转基因株系。  方法  利用花粉管通道法将EPSPS基因转入优良自交系京92中,通过田间草甘膦筛选和分子检测鉴定外源基因在世代间的遗传表达。  结果  在田间用200 mg·L-1的草甘膦除草剂筛选,T0代15个抗性植株经PCR鉴定,共获得10个阳性植株,转化率为1.03%;对各株系从T1代到T3代逐代筛选淘汰,株系内阳性株数逐渐增多,在T3代5个株系中分离出K3和K8两个整合了EPSPS外源基因的稳定遗传株系;进一步对K3和K8两个株系的T3代采用试纸条进行功能表达分析,发现目的基因均能正常表达。  结论  K3和K8两个转基因玉米株系后期可作为培育耐草甘膦的基础材料。
  • 图  1  T0代植株草甘膦筛选

    Figure  1.  Screening T0 plants for glyphosate-tolerance

    图  2  T0代草甘膦抗性植株PCR检测

    M:DL2000 Marker,-:阴性对照,W:无菌水,+:质粒对照,1-15:除草剂抗性植株。

    Figure  2.  PCR detection of T0 glyphosate-resistant plants

    M: DL2000 marker; -: negative control; W: sterile water; +: positive control; 1-15: herbicide-resistant plants.

    图  3  不同世代转基因植株草甘膦筛选

    a:T1代,b:T2代,c:T3代。

    Figure  3.  Screening transgenic plants in generations for glyphosate-tolerant plants

    a: T1 generation; b: T2 generation; c: T3 generation.

    图  4  不同世代草甘膦抗性植株PCR检测

    a:T1代,b:T2代,c:T3代。M:DL2000 Marker,-:阴性对照,W:无菌水,+:质粒对照,1-21:除草剂抗性植株。

    Figure  4.  PCR detection of glyphosate resistant plants in different generations

    a: T1 generation; b: T2 generation; c: T3 generation. M: DL2000 marker; -: negative control; W: sterile water; +: positive control; 1-21: glyphosate-resistant plants.

    图  5  EPSPS蛋白活性试纸条检测

    CK:受体对照,1-16:T3代转基因阳性植株。

    Figure  5.  Activity of EPSPS detected by strip test

    CK: Negative control; 1-16: transgenic plants in T3 generation.

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出版历程
  • 收稿日期:  2023-03-30
  • 修回日期:  2023-04-15
  • 网络出版日期:  2023-05-24
  • 刊出日期:  2023-05-28

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