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锌螯合法提纯石莼多酚工艺优化及其体外抗氧化活性评价
陈雨晴, 吕峰, 王金铭
摘要:
  目的  优化锌螯合法提纯石莼多酚工艺,评价提纯前后样品的抗氧化活性。  方法  以石莼多酚锌螯合率为指标,单因素试验初步探讨锌盐种类、氯化锌质量浓度、石莼乙醇粗提物质量浓度、乙醇体积分数、反应时间、pH 等6个因素对石莼多酚螯合锌的影响,并通过响应面法优化其关键工艺参数;以石莼多酚锌螯合物解离率为指标,确定解离剂EDTA质量浓度;比较分析提纯前后样品对ABTS+·、DPPH·、·OH的清除能力。  结果  以83 %乙醇溶液为溶剂,配制质量浓度为6.8 mg·mL−1的石莼乙醇粗提物样液,控制氯化锌质量浓度15.0 mg·mL−1,pH 8.0为优化提纯条件;此外控制螯合反应时间30 min,解离剂EDTA质量浓度20 mg·mL−1,提纯后样品中的石莼多酚含量由粗提物的6.95%增至25.18%,纯度提高了3.62倍。石莼乙醇粗提物与提纯物均具有良好的体外抗氧化活性,对三种自由基的清除能力顺序为·OH>DPPH·>ABTS+·。相比粗提物,提纯物对ABTS+·、DPPH·、·OH的清除能力分别提高了5.12、8.35、11.70倍,且当质量浓度分别达到16、12、8 mg·mL−1后,对应的清除能力与VC无显著性差异。  结论  经过工艺优化的锌螯合法可以显著提高石莼乙醇粗提物中的多酚含量及其体外抗氧化活性,为石莼多酚的深层次开发应用提供参考依据。
杂交水稻骨干亲本Wx基因第一内含子+1位碱基多态性分析
连玲, 潘丽燕, 朱永生, 许惠滨, 郑燕梅, 何炜, 罗曦, 王颖姮, 蔡秋华, 谢华安, 张建福
摘要:
  目的  直链淀粉含量是影响稻米品质的重要因素,而编码颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthetase,GBSS)的蜡质基因(Wx)是影响直链淀粉含量的主效基因。本研究拟分析120份杂交水稻亲本的Wx基因第一内含+1位碱基的多态性,以期研究其对内含子的剪接效率及Wx的表达的影响,为亲本育种筛选提供理论参考。  方法  选取120份水稻亲本材料,采用CTAB法提取基因组DNA,并以此为模版PCR扩增Wx基因片段;采用限制性内切酶Acc I对PCR产物进行酶切分析,根据琼脂糖电泳结果分析Wx基因第一内含子+1位碱基类型;同时测定其中19份亲本的直链淀粉含量、胶稠度和碱消值。  结果  PCR扩增结果显示所有材料中均可扩增出清晰且单一的目的条带;PCR产物的Acc I酶切分析结果显示,其中81份亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基是T,即为T型,占总数的67.5%,38份亲本为G型,占总数的31.67%,而仅有一份亲本为杂合型,即GT型,占总数的0.83%。19份亲本的直链淀粉含量测定结果表明,7份G型亲本的直链淀粉含量比12份T型亲本的高,且其中6个G型亲本的直链淀粉含量平均值均超过20%。另外,测定结果表明T型亲本和G型亲本的胶稠度和碱消值差别不明显。  结论  本研究分析获得了120份杂交水稻骨干亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基类型;测定结果表明,与T型亲本相比,G型亲本的直链淀粉含量明显较高,而胶稠度和碱消值没有明显差别。
百香果炭疽病病原鉴定及其药剂筛选
冉飞, 龙友华, 石金巧, 尹显慧, 吴小毛, 樊荣
摘要:
  目的  明确贵州省黔西南州贞丰县百香果炭疽病的致病病原菌,并筛选出防治百香果炭疽病的有效杀菌剂。  方法  采用组织块分离法对发病果实进行分离和纯化,并进行柯赫氏法则验证,结合形态学和多基因分子系统学进行鉴定,同时采用菌丝生长速率法研究6种杀菌剂对该病原菌菌丝生长的抑制作用。  结果  引起贵州省黔西南州贞丰县百香果炭疽病的病原菌为果生刺盘孢Colletotrichum fructicola;室内毒力测定发现6种杀菌剂对该病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中10%苯醚甲环唑WG的抑制效果最好,EC50为0.557 9 mg·L−1,其次是75%肟菌·戊唑醇WG、18.7%丙环·嘧菌酯SE和35%氟菌·戊唑醇SC,其EC50分别为1.035 4、2.772 6、2.841 5 mg·L−1  结论  明确了贞丰县百香果炭疽病的致病菌为果生刺盘孢;10%苯醚甲环唑WG、75%肟菌·戊唑醇WG、18.7%丙环·嘧菌酯SE和35%氟菌·戊唑醇SC对该菌具有较好的抑制作用,可作为防治百香果炭疽病的化学杀菌剂。
不同种植年限茶树根际土壤微生物数量和肥力之间关系初探
陈丽华, 刘兰英, 吕新, 李玥仁
摘要:
  目的  了解不同种植年限茶树根际土壤微生物数量和肥力指标之间的相关性,为茶园土壤改良和稳定生产提供依据。  方法  采用稀释平板法对武夷山茗上缘茶业有限公司试验茶园不同土层不同种植年限(5年,10年,15年)茶树根际土壤微生物数量进行研究,并与土壤肥力指标进行相关性分析。  结果  可培养微生物数量随着土层加深而减少;10年生茶树根际土壤可培养细菌数量最大,不同种植年限茶树根际土壤的可培养真菌数量在不同土层表现出不一样的变化趋势。茶树根际土壤酸化严重,pH值介于3.14~3.36;随着种植年限的增加,各项肥力指标的变化趋势不尽相同,0~15 cm土层的全磷和全钾含量随着种植年限的增加而降低,15~30 cm土层全氮和碱解氮的含量随着种植年限的增加而增加,其它的指标则在连续种植5年或10年的时候出现最高值或最低值。冗余分析发现,可培养细菌数量主要受速效钾和全磷含量的影响,可培养真菌数量主要受全氮和碱解氮含量的影响。  结论  采样点不同种植年限茶树根际土壤微生物数量和部分肥力指标之间存在着相关性。
红掌遗传多样性及亲缘关系的ISSR分析
户帅雅, 李斌奇, 陈孝丑, 巫伟峰, 张毅智, 陈春, 陈发兴
摘要:
  目的  通过ISSR分子标记技术对56个红掌品种进行遗传多样性及亲缘关系分析,为红掌新品种选育、品种改良、种质资源管理等研究提供参考依据。  方法  以采集到的56个红掌品种为试验材料,从100条哥伦比亚大学(UBC)公布的ISSR (inter-simple sequence repeat简单重复序列) 分子标记引物 中筛选出10条多态性引物,利用筛选得到的10个通用引物,构建红掌ISSR分子标记技术体系;对PCR扩增结果进行UPGMA(Unweighted pair-group method arithmetie average 非加权成组算术平均数)聚类分析,并计算其Nei’s基因多样性指数和Shannon’s信息指数。  结果  结果显示,从100条ISSR引物中筛选出10条多态性引物,共扩增得到99个基因位点,其中多态性位点95个,多态性比率为95.96%。用POPGENE分析结果得:Nei’s基因多样性指数(h)为0.3036;Shannon’s信息指数(i)为0.458 5。聚类分析结果表明56个红掌品种可以分为12类;  结论  结果表明,分类结果与火焰苞颜色存在一定的相关性,ISSR分子标记技术可以很好的应用于红掌品种及其亲缘关系的鉴定,罗兰公主、香妃、索米、彩霞、紫雷鸟、黑皇后、国王等7个品种性状独特,且相互之间遗传距离较远,可以作为新品种选育、品种改良的母本,也可以作为优良的种质资源进行保存。
不同品种百香果果汁香气物质定性与定量分析
潘葳, 刘文静, 韦航, 罗钦
摘要:
  目的  研究不同品种百香果果汁香气的组成成分与含量,确定百香果果汁主要香气物质。  方法  采用固相微萃取结合气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)等方法对5个品种百香果果汁的香气物质进行分析,利用SPSS 19.0软件对测定结果进行差异分析(VA)及主成分分析(PCA)。  结果  从5种百香果果汁中共检测出68种香气成分,其中24种成分为5个品种所共有;香气物质总含量变幅为2 882.80~10 740.42 μg·hg−1;香气物质种类最多的为‘紫香’(58种),其他依次为‘实生株系紫果’(56种)、‘台农’(55种)、‘芭乐味黄金果’(47种)和‘满天星’(39种);香气物质中酯类、醇类、酮类、萜烯类、烷类、醚类和杂环类占香气物质种类的比例分别为83.1%、3.6%、4.8%、3.7%、2.3%、1.7%、0.8%;PCA结果显示对百香果果汁香气影响较大的香气物质有正辛醇、4-辛烯酸乙醚、丁酸乙酯、己酸-3-己烯酯、β-二氢紫罗兰酮、己酸乙酯、己酸-3-戊酯、3-丁酸己烯酯、己酸己酯、1-甲基-3-(2,6,6-三甲基环己-1-烯基)乙酸丙酯、1-环己烯-2,6,6-四甲基 -丙醇和乙酸己酯。  结论  百香果果汁主要香气物质由酯类、醇类、酮类、烯类、烷类、醚类和杂环类组成;百香果果汁主要香气物质为正辛醇、4-辛烯酸乙醚、丁酸乙酯、己酸-3-己烯酯、β-二氢紫罗兰酮、己酸乙酯、己酸-3-戊酯、3-丁酸己烯酯、己酸己酯、1-甲基-3-(2,6,6-三甲基环己-1-烯基)乙酸丙酯、1-环己烯-2,6,6-四甲基 -丙醇和乙酸己酯;不同品种百香果果汁的香气物质含量存在显著差异(P<0.05)。
响应面法优化鸡肉蛋白酶解工艺
于亚辉, 陈沁雯, 李晓婷, 方婷
摘要:
  目的  采用双酶分步酶解的方法优化鸡肉蛋白酶解工艺,为制备品质较佳的鸡肉香精提供技术参考。  方法  以动物蛋白酶与复合蛋白酶为目标酶,游离氨基酸浓度与多肽浓度为评价指标,在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman设计筛选出重要影响因素。接着采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,确定响应面优化试验中心点,最后选取游离氨基酸浓度与多肽浓度以及热反应产物风味评分三个指标为评价依据,采用Box-Behnken响应面优化法,探讨鸡肉蛋白双酶分步酶解工艺及其对制备鸡肉香精风味的影响,确定了重要参数的最佳水平。  结果  试验结果表明:总加酶量、总时长、固液比为主要影响因素,通过响应面及岭脊分析确定参数值分别为0.82%、7.26 h、1 4.40预测综合得分为89.41,实际得分88.97,模型可靠。  结论  通过多指标响应面法优化了鸡肉蛋白酶解条件,能够提高酶解效果,并制备出了风味较佳的鸡肉香精。
不同施钾水平对无花果糖积累及相关酶活性的影响
郭傲, 林绪坚, 高欢欢, 郑雪莲, 陈默, 郑国华
摘要:
  目的  通过研究不同施钾水平对无花果果实糖代谢的内在调控机制,为无花果合理施肥,提高无花果果实品质和产量提供理论依据。  方法  以2年生的‘波姬红’无花果为试材,在常规栽培管理前提下,增施4个水平的K2SO4,施钾量分别为:CK(0 g·株−1)、K1(125 g·株−1)、K2(250 g·株−1)、K3(375 g·株−1),进行对照试验。测定各个施钾水平下无花果果实的可溶性糖、淀粉含量及糖代谢相关酶活性等各项指标,并分析不同指标之间的相关性。  结果  (1)果糖与葡萄糖是无花果中主要的可溶性糖,其含量随着果实的发育逐渐上升。淀粉含量与可溶性糖含量的变化趋势相反,整体呈下降趋势。(2)与对照相比,增施钾肥能显著提高无花果果实中可溶性糖及各糖组分含量,降低果实发育中后期淀粉含量。施钾量在250 g·株−1(K2)时可溶性糖含量增幅最大,为最适用量。(3)适量施钾显著提高了无花果果实发育早期和末期AI和SS(分解方向)的活性,对NI影响较小,但极显著地提高了NI在果实发育成熟期的活性,促进了果实中果糖和葡萄糖含量的积累。适量施钾使α-淀粉酶和β-淀粉酶活性逐渐上升,且一直保持在较高水平,促进了淀粉向可溶性糖的转化。适量施钾提高了无花果发育各个时期的SPS活性,但对SS(合成方向)的影响较小,促进了蔗糖的积累。  结论  适量施钾可以提高糖代谢相关酶活性,促进果实中淀粉的分解和可溶性糖的积累。
贵州茶树主栽品种福鼎大白茶冷害指标研究
侯双双, 古书鸿, 谷晓平, 薛旭, 韩淑梅, 胡家敏, 刘宇鹏
摘要:
  目的  为了探明贵州茶叶主栽品种福鼎大白茶的低温冷害指标,为精准的茶叶气象指数保险和茶叶农业气象服务提供科学指导。  方法  利用人工气候室模拟贵州低温冷害天气过程,测定茶叶不同低温冷害过程中生理指标以反映茶叶低温环境下的生长状态;拟合细胞伤害率与低温胁迫之间的Logistic函数关系确定茶树生长的低温半致死温度以量化不同低温冷害天气过程中茶叶的冷害指标。  结果  研究结果表明:随低温程度的加重,SOD活性大致呈上升趋势,MDA大致呈先升高后下降趋势,相对电导率R呈持续上升趋势;低温冷害持续日数不同,对应低温半致死温度不同,低温持续时间越长低温半致死温度越高,低温冷害天气持续3、5和7 d时,低温半致死温度分别为1.5 ℃、1.8 ℃和2.6 ℃。  结论  研究结果表明福鼎大白茶冷害生长响应特征与低温冷害程度和持续天数密切相关:最低温度3 ℃以下的低温危害比3 ℃以上大;低温过程持续7 d的低温危害比持续3 d和5 d时严重;低温半致死温度随冷害持续时间的延长而升高,因此低温冷害指标的制定应依据当地倒春寒冷害气候特征进行量化。