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四季秋海棠BsMYB62基因酵母双杂交诱饵载体的构建及互作蛋白的筛选
刘静, 王阳, 姚珂心, 屈莹, 王瑞博, 刘胜男, 李永华, 张开明
摘要:
  目的  低温和高光均能引起四季秋海棠(Begonia semperflorens)叶片因合成积累花色素苷而变红。本研究从低温和高光处理四季秋海棠的转录组中筛选并克隆得到一个 MYB 转录因子基因并命名为 BsMYB62 ,对其进行生物学信息分析,并从四季秋海棠cDNA文库中筛选出与其互作的蛋白。本研究结果对阐明 BsMYB62 基因功能具有指导意义。  方法  设计BsMYB62引物,克隆 BsMYB62 CDS区,利用生物信息学软件对BsMYB62基因序列及其编码蛋白序列分析。构建 pGBKT7-BsMYB62 酵母双杂交诱饵载体,对该诱饵载体进行毒性和自激活检测后, 用 Mating 法筛选BsMYB62的互作蛋白。  结果   BsMYB62 基因的 CDS 区为 801bp(NCBI 登录号:MT560845),编码266个氨基酸。 pGBKT7-BsMYB62 有自激活现象 ,对宿主酵母菌无毒性。在含 45mM 3-AT 的 SD/-Trp-Leu-His-Ade 培养基上能明显抑制 BsMYB62 蛋白的自激活。酵母双杂交结果显示与 BsMYB62 蛋白互作的蛋白有 9 类,分别是 XTH9、LHB1B2、EBS7、PSI-F、UBE2、FDH、RBCS1A、FP6 和 BCA。  结论  推测四季秋海棠BsMYB62 蛋白与以上9类蛋白互作响应低温、高光胁迫。
柳叶蜡梅真菌病害分离鉴定及生物学特性
彭成彬, 王泽榕, 阮俊峰, 魏日凤, 薛岚, 陈美霞, 刘伟
摘要:
  目的   为明确柳叶蜡梅(Chimonanthus Salicifolius)的叶部病害的病原种类,进行病叶病原分离鉴定并研究病原菌株生物学特性。   方法   本研究对福建省寿宁县福瑞泰生物技术有限责任公司种植基地的柳叶腊梅叶斑病病叶采用离体组织分离法进行分离,对分离的病原菌采用形态学结合分子方法(rDNA-ITS和TUB序列)进行鉴定,并对该致病菌菌丝体在不同温度、pH值、光照、碳源、氮源及致死温度等条件下的生物学特性进行了研究。   结果   病原菌分离株经形态特征观测及rDNA-ITS和TUB序列在NCBI数据库的分析比对,将寿宁县柳叶腊梅叶斑病病原菌鉴定为子囊菌门,格孢腔目,附球真菌属,高粱附球菌(Epicoccum Sorghinum)。生物学特性结果显示:在 5~30℃均可生长,最适生长温度 25℃;菌丝体生长最适pH值范围为5~9,在供试的11种碳源上均可生长最佳碳源为蔗糖;在8种氮源培养基中最适菌丝生长的氮源为蛋白胨;光暗交替不影响菌丝生长,菌丝体致死温度为 52℃。   结论   分离鉴定了福建省寿宁县柳叶腊梅叶斑病病害的病原菌为高粱附球菌E. sorghinum,其生物学测定结果显示对环境适应性强。
顶空固相微萃取-气相色谱质谱法分析红富士葡萄果实香气
李凯, 商佳胤, 苏宏, 田淑芬, 黄建全, 张娜, 王丹, 王超霞
摘要:
  目的   检测分析天津产区红富士葡萄果实香气,研究其葡萄果实的活性呈香成分及香气特征。   方法   采用顶空固相微萃取(HS-SPME)及气相色谱-质谱技术(GC-MS)提取检测果实香气,内标-标准曲线法定量,结合气味活性值及果实香气轮廓,分析葡萄果实活性呈香成分及香气特征。   结果   天津产区红富士葡萄果实中共定性定量39种香气化合物(总浓度9737.05 μg·L−1),酯类浓度最高,醇类次之;乙酸乙酯、1-己醇、反式-2-己烯-1-醇、丁酸乙酯和反式-2-己烯-1-醛是5种主要香气成分,它们的浓度之和(9461.79 μg·L−1)与检出化合物总浓度的比值高达97.17%,其中乙酸乙酯浓度(9036.53 μg·L−1)最为突出,分别占酯类浓度、总浓度的98.53%和92.81%;气味活性值结果显示,其果实香气主要由丁酸乙酯、2-甲基丁酸乙酯、己酸乙酯和异丁酸乙酯等12种活性呈香成分贡献;香气轮廓直观地显示,其果实香气主要由花卉类、水果类、植物类、脂肪类、化学类和香料类气味构成,其中水果类气味最为突出。   结论   天津产区红富士葡萄果实香气主要由酯类、醇类和醛类成分构成,含量最为丰富的酯类化合物贡献了突出的水果类气味。
油棕多胺合成酶基因的分离及其在低温和脱水胁迫下的表达分析
金龙飞, 尹欣幸, 张安妮, 曹红星
摘要:
  目的   研究多胺合成酶基因在油棕生长发育及非生物胁迫应答中的作用,为油棕抗性品种培育提供理论基础。   方法   从油棕基因组中鉴定出15个编码多胺合成酶的基因,并对其进行生物信息学分析和表达模式分析。   结果   多胺合成酶的氨基酸长度为318~720,分子量为36.00~46.43 kDa,等电点为4.78~6.31,蛋白不稳定指数为29.26~48.73,脂溶指数为76.46~94.41,总平均亲水性为-0.315~0.082,外显子数目为1-11个,具有特定的蛋白保守基序和保守结构域。进化分析发现油棕多胺合成酶基因可以分为3个家族,EgADCs与水稻的亲缘关系较近,EgACLsEgSPDSs与椰枣的亲缘关系较近,EgSPMSs与玉米的亲缘关系较近。启动子上鉴定出大量植物激素响应、逆境胁迫响应和光响应的顺式作用元件。组织表达分析发现多胺合成酶基因在油棕不同组织中均有表达;多胺合成酶基因受低温和脱水胁迫的诱导。   结论   多胺合成酶基因参与油棕对低温和脱水胁迫的应答,其中EgSPDS1EgSPDS2EgSPMS1EgADC1EgADC2EgACL5-2EgACL5-3EgSAMDC3-1EgSAMDC4-1EgSAMDC4-2EgACL5-1受低温胁迫的诱导,EgSPDS1EgSPDS2EgADC1EgADC2EgSAMDC4-1Eg SAMDC4-2EgACL5-1受脱水胁迫的诱导。
低温抑制中国水仙花芽分化的生理生化机制
李霖, 李婷婷, 杨坤, 张志忠, 吴菁华
摘要:
  目的  探讨15℃低温抑制中国水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)花芽分化的生理机制,为中国水仙花期调控提供理论依据。  方法  选用中国水仙‘金盏银台’三年生鳞茎球为材料,以15℃低温进行处理,常温贮藏为对照,测定水仙在两种贮藏温度下鳞片的保护酶活性、可溶性蛋白以及糖类物质的含量变化。  结果  整个观测期间常温组水仙鳞片中超氧阴离子(O2·)含量和过氧化氢(H2O2)含量均呈升-降-升的变化趋势,超氧化物歧化酶(SOD)活性在花芽分化过程中始终维持较高水平,过氧化物酶(POD)活性则处于低水平,过氧化氢酶(CAT)活性在花芽分化后期显著上升,蔗糖和淀粉含量在花原基分化期迅速下降,同期α-淀粉酶和可溶性糖保持较高水平。15℃低温处理后鳞片中O2·和H2O2含量均高于同时期常温组;SOD活性变化趋势与常温组类似;在与常温组雄蕊原基分化期对应的时间段,15℃低温处理组的POD活性和CAT活性显著增强;各时期鳞片中可溶性糖、蔗糖、淀粉含量及α-淀粉酶活性都低于常温组。  结论  可溶性糖、蔗糖和淀粉含量在花芽分化过程中起重要作用,低温15℃处理后大大影响了糖类物质的积累,进而影响花芽分化,这种影响在花原基分化时期变化最为剧烈。
酸性土壤玉米根际土壤细菌群落对秸秆还田和土壤调理剂的响应
张慧, 林陈强, 陈龙军, 陈济琛
摘要:
  目的   以福建省黄泥田土壤为研究对象,探讨不施化肥(CK)、单一施化肥(T1)、化肥配施秸秆还田(T2)、化肥配施土壤调理剂(T3)4组处理玉米根际土壤细菌群落组成、多样性和结构的变化。   方法   利用 Illumina Miseq测序平台对四组处理土壤样品进行测序,基于第二代高通量技术分析不施化肥(CK)、单一施化肥(T1)、化肥配施秸秆还田(T2)、化肥配施土壤调理剂(T3)的玉米根际土壤细菌的16S rRNA基因在V3-V4区域的多样性指数、丰富度以及群落组成和结构。   结果   4个处理的玉米根际土壤细菌优势门(相对丰度>10%)为变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteria)。T1处理细菌的丰富度指数(ACE指数和Chao1指数)较CK均有所降低,分别降低17.65%和17.88%;T3处理的细菌丰富度指数(ACE指数和Chao1指数)高于CK处理,分别提高14.52%和14%。分层聚类图显示细菌属水平上,CK、T1和T2处理土壤样品细菌群落结构相似性较高,T3与其他3个处理细菌群落结构差异较大。   结论   化肥配施土壤调理剂对土壤细菌群落结构影响大于单一施化肥和化肥配施秸秆还田处理,单一施化肥降低了根际土壤细菌的丰富度,化肥配施土壤调理剂可以显著提高玉米根际土壤细菌群落的丰富度,施用土壤调理剂提高酸性土壤pH对玉米根际细菌群落影响最大。
普定朵贝茶品质与土壤特性的关系研究
郭建军, 王津津, 马强, 周艺, 李慧慧, 武国华
摘要:
  目的  分析贵州朵贝茶产地土壤特性及其对茶叶品质的影响,为改良朵贝茶茶园养分管理和提升茶叶品质提供理论依据。  方法  采集普定朵贝茶9个不同种植区的土壤,测定土壤中金属含量和其pH值、有机质、有效磷、碱解氮、速效钾等养分状况及蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶的活性,并与各种植区朵贝茶的营养成分和感官审评及其抗氧化活性进行相关性分析。  结果  9个不同种植区土壤中有机质含量和有效磷均达到Ⅰ级肥力标准,碱解氮和速效钾总体偏低。其中7#种植区土壤特性最好:有机质为45.57 g·kg−1,碱解氮为46.90 mg·kg−1,有效磷为14.81 mg·kg−1,速效钾为157.00 mg·kg−1,pH为4.68。结合茶感官审评和营养成分分析,各种植区朵贝茶品质呈“嫩、鲜、浓、醇”特征,其中1#、2#和7#种植区茶品质较好,7#种植区茶体外抗氧化能力最强。相关性分析表明:土壤有机质、碱解氮含量和脲酶、蔗糖酶活性较高对茶营养成分品质和各项感官评审因子具有正向作用;而土壤pH升高、有效磷含量和过氧化氢酶活性较高对茶营养成分品质和各项感官评审因子具有逆向作用。  结论  总体,提高朵贝茶品质,应以“补氮补钾控磷,增加有机质”为管理措施。
绿豆萌发期耐旱种质资源筛选评价和遗传多样性分析
黄年英, 朱珍珍, 刘昌燕, 廖芳丽, 李莉, 陈宏伟, 刘良军, 韩雪松, 万正煌, 沙爱华
摘要:
  目的  鉴定56份绿豆种质种子萌发期耐旱性,明确其遗传特性。  方法  采用10%甘露溶液模拟干旱胁迫,以相对发芽率、相对发芽势和相对根长等10个指标作为耐旱性评价指标,通过主成分分析、隶属函数分析和多元分析方法鉴定种质耐旱性。基于SSSR扩增对56份绿豆种质资源进行分子聚类,明确其遗传基础。  结果  干旱胁迫对萌发期10个耐旱性评价指标具有不同程度影响。主成分分析显示前三个综合指标贡献率分别为57.87%、16.42%、和11.42%,累积贡献率达到85.71 %,可以代表10个评价指标的变异信息。根据主成分分析计算得到的综合评价值D对56份种质耐旱性进行评价,鉴定出2份高耐、10份耐旱、30份中耐、13份敏感和1份高敏种质。基于SSR聚类将56份种质划分为3个主要类群,第1类群包含25份种质,表现为较耐旱。第2类群包含26份种质,遗传基础复杂,表现出不同程度的耐旱性。第三类群包含5份种质,表现为偏敏感。  结论  明确了56份绿豆种质萌发期的耐旱性及其遗传特性,为利用这些种质开展绿豆耐旱育种奠定了基础。
簇生稻穗发育及细胞周期相关基因的表达分析
陈丽萍, 蒋家焕, 郑燕梅, 朱永生, 王颖姮, 林强, 谢鸿光, 罗曦, 蔡秋华, 谢华安, 张建福
摘要:
  目的  穗粒数的增加可以直接提高水稻的产量,簇生穗能增加穗粒数和着穗密度。本研究目的为考察簇生稻品种内江P164与对照单粒稻品种9311中OsCl-6等穗发育及细胞周期相关基因的表达是否存在显著差异,探索通过调控品种中特定基因的表达量来指导水稻生产,为高产水稻品种选育提供理论依据。  方法  分别取种植于网室大田的簇生稻品种内江P164和对照单粒稻品种9311的幼穗进行RNA提取、qRT-PCR分析及相关数据分析。  结果  qRT-PCR结果显示,对于所选取的几个幼穗发育时期,OsCl-6的表达量在内江P164的幼穗中的表达量均高于9311。细胞周期依赖激酶类基因在9311中的表达高于内江P164,而B类细胞周期蛋白则在内江P164中的表达高于9311。Lax1OsWOX3RFL等穗发育相关基因在内江P164中的表达低于9311,而MFS1CL-4的在内江P164中的表达则高于9311。  结论  簇生穗基因OsCl-6等穗发育相关基因及B类细胞周期蛋白在簇生稻品种内江P164与对照单粒稻品种9311中的表达存在显著差异,OsCl-6或通过表达量上调来抑制二次枝梗的发育等,将为深入挖掘穗发育相关基因之间的关系及簇生穗基因OsCl-6的分子机理研究提供参考。
粘质沙雷氏菌灵菌红素合成基因簇异源表达及其潜在的温度调控机制
刘方晨, 贾宪波, 吴良泉, 方宇, 赵恪, 林俊杰, 陈龙军, 张慧, 林陈强, 陈济琛
摘要:
  目的  构建粘质沙雷氏菌FZSF02灵菌红素合成基因簇的异源表达菌株,探究其合成灵菌红素可能的温度调控机制。  方法  构建3种携带不同启动子的异源表达大肠杆菌菌株,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FZSF02中pig基因簇pigApigFpigN基因在37 ℃与28 ℃培养条件下的转录水平差异。  结果  在28 ℃低温条件下,3种不同的启动子均能在大肠杆菌中启动各自重组质粒所携带的pig基因簇表达并合成灵菌红素,其中携带T7强启动子的重组菌株经IPTG诱导后可以在37 ℃少量合成色素,其余菌株37 ℃不能合成色素。RT-qPCR结果显示在粘质沙雷氏菌中上述基因转录水平在37 ℃条件下较28 ℃出现下调。  结论  粘质沙雷氏菌FZSF02之所以能够在28 ℃合成灵菌红素而在37 ℃无法合成灵菌红素,一方面由于pig基因簇的编码基因转录水平下调,另一方面是由基因簇编码的合成灵菌红素所需前体MBC和MAP的一种或者几种关键酶在相对较高的温度(37 ℃)条件下活性受到抑制导致。
麻地膜对设施网纹甜瓜产量品质与土壤环境的影响
田航飞, 宋晓勇, 韩冰, 陈晓峰
摘要:
  目的  为进一步验证麻地膜覆盖栽培在瓜类作物上的应用效果,本研究通过对比试验比较麻地膜覆盖栽培对网纹甜瓜生长微环境以及其生长发育的影响,进而为麻地膜在设施栽培中的应用提供理论依据。  方法  以网纹甜瓜“鲁厚甜1号”为试材,采用单因素随机区组设计方法,研究3种覆盖栽培方法对日光温室网纹甜瓜生长发育以及设施内土壤环境的影响。  结果  与无地膜覆盖栽培处理(CK)相比,麻地膜(MDM)和PE农用薄膜(PEBM)覆盖栽培地温可提高3.3 ℃左右;MDM处理在一定程度上可以提高土壤含水量,且与PEBM处理没有明显差别。生育期观察发现,MDM、PEBM处理网纹甜瓜植株的授粉日期比CK分别提前了3、4 d,果实采收日期均提前了10 d;与对照相比,MDM和PEBM处理单果重分别提高18.4%和14.7%;MDM处理下增产效果较PEBM处理显著,小区产量和单位面积产量均较PEBM处理提高了3%左右;与CK处理相比,MDM和PEBM处理果实可溶性糖含量分别提高10.7%和9.9%;网纹甜瓜采收结束后,对土壤养分含量进行测定,结果表明,同CK相比,MDM、PEBM处理下土壤速效氮分别下降13.0、9.0 mg·kg−1,土壤速效磷分别下降17.0、9.0 mg·kg−1,土壤速效钾分别下降33.0、24.0 mg·kg−1,但各处理间土壤全效养分含量变化不显著。MDM处理对土壤内微生物的数量有较大影响,其中细菌和真菌的数量增长量最大,分别比CK高101.6%和70.66%,放线菌数量表现出微弱的增长,比CK高23.24%。  结论  研究结果证实麻地膜覆盖栽培适用于设施网纹甜瓜无公害栽培。
太子参根际土壤pH值和主要化学性质与微生物多样性的相关性分析
高慧芳, 许佳音, 孟婷, 陈金绍, 邱君志, 张重义, 张燎原
摘要:
  目的  探究不同区域栽培太子参产生连作效应的潜在原因。  方法  采用高通量测序对柘荣县5个样地的太子参根际土壤进行微生物群落结构及多样性分析。  结果  土壤真菌的有效序列共744331条,聚类后获得1314个真菌分类单元;获得细菌1032029条有效序列,聚类后获得10310个细菌分类单元。5个样地的共有OTU数明显多于每个样地特有的OTU,表明不同样地的太子参根际土壤微生物群落趋势大致相同。α多样性分析表明,不同样地根际土壤微生物群落组成及丰度之间有明显差异,Ⅳ、Ⅱ、Ⅰ样地的物种丰度较高,而Ⅴ、Ⅲ样地的物种丰度较低。典范对应分析表明土壤化学性质和根系分泌物酚酸类物质影响太子参根际土壤微生物的群落分布。5个样地中都鉴定到镰刀菌属等致病真菌,且致病菌的含量与根际土壤其他微生物物种数呈反比,暗示镰刀菌影响太子参根际土壤其他微生物物种数。  结论  太子参连作效应及其病害的成因很大程度上归因于其根系分泌物塑造的根际微生物菌群结构和多样性演变以及病原菌增多紧密关联。
福建鲜籽粒大粒蚕豆种质资源的引进及评价
李程勋, 李爱萍, 徐晓俞, 郑开斌
摘要:
  目的  引进国内先进的大粒蚕豆种质资源在福建地区种植,对其农艺性状进行鉴定评价,筛选出适宜福建地区种植的优良大粒蚕豆品种。  方法  以福建省认定的陵西一寸品种为对照,对来自青海、江苏的10个大粒蚕豆品种进行比较试验,观测其生育期、株高、分枝数、荚长、荚宽、鲜荚产量、籽粒长、籽粒宽、百粒重、出籽率、鲜籽粒产量等指标,并进一步分析产量性状间的相关性。  结果  生育日数、单荚鲜重、荚宽、鲜籽粒百粒重与鲜荚每667 m2(下同)产量有极显著的正相关,分枝数、单株实荚数与鲜荚产量显著正相关,株高与鲜荚产量显著负相关。青海大粒蚕豆品种在福建表现为生育期短、株型高、分枝少、产量低、总体经济产值低,江苏的通蚕品种整体表现较好,其中通09-110-1蚕豆品种的荚长、荚宽、鲜荚产量、籽粒长、籽粒宽、百粒重、出籽率、鲜籽粒产量等指标值均较高,干籽粒百粒重为200.08 g,出籽率达到50.53%,鲜荚产量达到1200.58 kg,高出对照32.81%。  结论  通09-110-1蚕豆品种在福建地区种植时表现良好,适宜在福建地区推广种植。
畲药十二时辰及其混淆品基原植物基因组DNA提取及鉴别研究
何舒澜, 李泳宁, 朱扶蓉
摘要:
  目的  建立一种快速经济地提取畲药十二时辰基原植物基因组DNA的方法,实现通过分子生药学方法准确鉴别该中草药的真伪,为进一步开发应用该福建地区特色中草药奠定基础。  方法  采用CTAB法、改良CTAB法、试剂盒法、SDS法、高盐低pH法提取十二时辰基原植物叶片基因组DNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的质量和完整性,用优选后的方法提取其基因组DNA,与其混淆品DNA分别进行双向测序,评价该分子生药学方法的鉴别效果。  结果  改良CTAB法提取得到的DNA纯度较高,SSR引物扩增与ITS2序列扩增均可得到清晰明亮的条带,是提取畲药十二时辰基原植物基因组DNA的最佳方法。用该方法提取得到的基因组DNA经PCR扩增后的产物可用于双向测序,进而鉴别它的基源,实现与常见混淆品的准确区分。  结论  本研究建立的改良CTAB法能有效地提取畲药十二时辰的基因组DNA,方法操作简单、提取得到的DNA质量较好,可用于畲药十二时辰与其混淆品的分子生药学鉴别。
一例半番鸭感染鸭瘟的病原分离鉴定及病理组织学观察
张瑞, 刘荣昌, 陈长福, 黄瑜, 程龙飞, 傅光华, 施少华, 陈红梅, 万春和, 傅秋玲
摘要:
  目的  2020年8月,福建省福州地区某鸭场饲养的半番群发病,发病率约为65%,病死率高达90%以上,感染鸭皮肤表面可见大量出血,为明确其病原和病理组织学特征。  方法  分别采集发病鸭的肝脏、脾脏、胰腺、肾脏、皮肤等组织进行鸭常见病原检测、病毒分离鉴定、基因序列测定分析及病理组织学观察。  结果  病原检测结果显示,所采集组织仅鸭瘟病毒PCR检测呈阳性,其余病原均为阴性;对阳性样品进行病毒分离鉴定,结果从发病鸭内脏组织和皮肤中分离出鸭瘟病毒,命名为FJ2020176。对新分离鸭瘟病毒FJ2020176株UL2基因进行序列测定与分析发现,其与鸭瘟强毒株CHv株、CV株和2085株的核苷酸同源性为97.8%~99%;与疫苗株VAC株、Attenuatedstrain 1株和Attenuated strain 2株等弱毒株相比,FJ2020176株在UL2基因中存在528 bp的核苷酸插入,表明该毒株为鸭瘟病毒强毒株。病理组织学观察显示,感染鸭可见肝脏局灶性坏死、出血;脾脏组织白髓减少,淋巴细胞坏死、脱落;肾脏出血、淤血;法氏囊出血,淋巴小结坏死;皮下出血。  结论  从皮肤大量出血的发病鸭中分离到一株鸭瘟病毒强毒株,表明皮肤出血亦为鸭瘟病例的临床特征,以上结果为临床上鸭瘟的诊断提供了新的试验数据。
本氏烟中与番茄斑萎病毒N蛋白互作的寄主因子的筛选
苗淑月, 高晓晓, 郑立敏, 陈建斌, 赵星月, 程菊娥, 陈莎, 章松柏, 刘勇
摘要:
  目的  番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus, TSWV)是植物多分体负义链RNA病毒的代表性成员。TSWV的N蛋白在病毒感染的寄主植物内表达量高,可能调控病毒对寄主的感病,本研究对TSWV N蛋白与本氏烟中寄主因子相互作用开展研究,探究N蛋白通过影响哪些寄主蛋白的表达来完成病毒的侵染,以期为深入解析寄主蛋白调控病毒的分子机制提供理论基础,为后续有效的防控TSWV提供新的思路。  方法  以TSWV N蛋白作为诱饵蛋白,采用酵母双杂交(Yeast two-hybrid, Y2H)的方法筛选本氏烟内与TSWV N相互作用的寄主蛋白。  结果  共筛选获得15种与TSWV N相互作用的寄主蛋白。  结论  这些介体因子主要参与色素的生物合成、类囊体膜的组装、植物防御反应和核糖体生物发生的过程,调节脂质代谢和细胞功能,可能是翻译调控的辅助蛋白,在植物发育和对非生物胁迫的反应中发挥着重要作用。
福建省七叶一枝花细菌性软腐病病原鉴定
郑梅霞, 苏海兰, 肖荣凤, 何桂强, 朱育菁
摘要:
  目的   调查七叶一枝花软腐病的发病特点及危害,分离和鉴定七叶一枝花软腐病的病原菌,以期明确七叶一枝花软腐病的病原菌,为该病的大田防治提供依据。   方法   通过对七叶一枝花软腐病进行田间病害调查和采样,以及对采集来的七叶一枝花样品进行病原菌分离纯化、形态特征鉴定、16S rDNA基因序列特征及致病性测定,综合分析鉴定七叶一枝花软腐病的病原菌。   结果   七叶一枝花软腐病的田间病害调查结果表明从每年2月植株出苗开始,七叶一枝花叶片、茎秆和块茎均有软腐病发生,常发于通气不良、田里积水环境。叶片发病由初期受害部位的水浸状的坏死有刺激性气味产生,而后感病部位内部组织被分解为液体状态,直至软腐。对发病植株上分离出的菌株进行形态学、分子生物学特征和致病性测定,将七叶一枝花软腐病病原菌鉴定为胡萝卜软腐果胶杆菌Pectobacterium carowvorum   结论   七叶一枝花在通气不良、排水不畅的环境中易感软腐病,胡萝卜软腐果胶杆菌P. carowvorum是七叶一枝花软腐病的病原菌。
福清山羊快长品系的世代选育及生产性能测定分析
刘远, 李文杨, 吴贤锋, 毛坤明, 林云琴, 黄勤楼
摘要:
  目的  评估福清山羊快长品系的选育效果。  方法  对福清山羊连续选育的2个世代后代生长性能及繁殖性能指标进行统计分析。  结果  结果表明,经过连续2个世代的严格系统选育,福清山羊快长品系各世代核心群的生长性状和繁殖性状均有所提高,其中生长性状的遗传进展和群体整齐度均高于繁殖性状。福清山羊快长品系所产后代的2月龄、9月龄和12月龄的体重指标随着选育世代的增加而逐渐提高,各阶段体重在3个世代间均达到差异显著水平(P<0.05),且各世代相同测定阶段的体重变异系数也呈现逐步减小的趋势(9月龄体重除外)。对比于零世代,二世代2月龄体重、9月龄体重和12月龄体重分别提高了7.45%、11.74%和10.70%。各世代核心群后代的初生体重差异不显著(P>0.05),断奶活羔率和断奶羔羊重均随着选育世代的增加而逐渐提高,3个世代间的断奶羔羊重差异显著(P<0.05),分别为9.42、9.95、10.15 kg。  结论  经过连续2个世代的系统选育,福清山羊快长品系的生长性状得到了有效改良,实现了快长品系选育的生长性状既定目标。
基于PPIN茶树抗假眼小绿叶蝉研究
王芬, 裴会敏, 文狄, 陈志, 李静
摘要:
  目的  细胞生长的每个阶段都离不开蛋白质相互作用,研究假眼小绿叶蝉侵染茶叶后差异基因参与的蛋白质相互作用对解析抗虫分子机理具有指导意义。  方法  通过对有无受假眼小绿叶蝉侵害的都匀毛尖茶树鸟王种进行转录组测序,基于同源比对算法构建0 h与12 h、0 h与24 h的差异基因蛋白质相互作用网络。  结果  结果表明,0 h与12 h的差异基因共有212个互作,0 h与24 h的差异基因共有3 551个互作,合并网络后得到3 605个互作,并对网络进行拓扑属性分析,发现网络中的蛋白质符合幂律分布。通过网络可以进行蛋白质的功能预测,并且对网络进行GO和KEGG分析发现差异基因的蛋白互作主要参与植物病原体互作,植物激素信号转导,DNA碱基切除修复、核酸切除修复、错配修复,亚麻酸和亚油酸代谢等生物过程,并且侵染24 h比侵染12 h需要启动更多的互作来抵御假眼小绿叶蝉的侵染。  结论  研究结果为探究鸟王种受假眼小绿叶蝉取食前后茶树抵御假眼小绿叶蝉侵染的代谢机理提供参考,为都匀毛尖病虫害防治、后续良种选育和引种奠定基础。
山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析
江锦秀, 张靖鹏, 林裕胜, 游伟, 胡奇林
摘要:
  目的   明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)SU蛋白的功能。   方法   采用RT-PCR 方法从 ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到pMD-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a(+)上,在RosettagamiB(DE3) 感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE 、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。   结果   结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 kD,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、37 ℃诱导4 h表达效果最好。用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行 Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应。   结论   表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础。
怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶基因的克隆和分析
洪森荣, 邓雨晴, 吴洪婷, 陈婷, 郭淑贞, 杨于萱, 蔡红, 陈荣华
摘要:
  目的  蔗糖合酶是植物蔗糖代谢途径中的关键酶,在植物的生长发育过程中具有重要作用。分析蔗糖合酶的核酸序列信息,预测其蛋白结构与功能,以期揭示该酶生物学功能。  方法  通过怀玉山高山马铃薯(Solanum tuberosum L. cv. Huaiyushan,缩写S. tuberosum L. cv. Huaiyushan)试管苗转录组数据库筛选到蔗糖合酶基因的核心片段(PGSC0003DMG400002895,SuSy 4),利用RT-PCR 技术克隆怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶基因,并采用生物信息学方法进行序列分析。  结果  怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶基因cDNA总长度为2418 bp,G+C 含量为45.08%;怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶由805个氨基酸组成,分子量92 471.33 Da,等电点5.87,为亲水性蛋白;怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶的二级结构包括α-螺旋(45.84%)、β -片层(15.16%)、无规则卷曲(39.01%),C端和N端含β -片层和α-螺旋,而无规则卷曲、延伸链、β -片层和α-螺旋则散布于整个蛋白质中;怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶的三级结构为四聚体;怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶主要存在细胞质、线粒体和叶绿体中;怀玉山高山马铃薯与番茄(Solanum lycopersicum)、潘那利番茄(Solanum pennellii)、智利番茄(Solanum chilense)、马铃薯(Solanum tuberosum)、辣椒(Capsicum annuum)、风铃辣椒(Capsicum baccatum)六种植物在一个大分支下,这说明怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶基因在进化上与这六者的亲缘关系较近,尤其是与马铃薯的进化上具有最高的亲缘关系。  结论  怀玉山高山马铃薯蔗糖合酶基因具有典型蔗糖合酶的结构特征,氨基酸序列及核酸序列与同源物种相似度高,在进化上高度保守,对进一步揭示该酶生物学功能具有重要意义。
艾纳香种质资源表型性状遗传多样性分析
肖永锋, 黄梅, 于福来, 陈振夏, 廖丽, 庞玉新
摘要:
  目的  分析艾纳香种质资源表型性状的多样性,为良种选育提供科学依据。  方法  以159份艾纳香种质资源为材料,进行9个数量性状和13个质量性状的测定,并采用遗传多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法进行遗传多样性分析。  结果  数量性状中遗传多样性指数最高的是株高(2.072),变异系数最大的是花枝数(32.76%);质量性状中遗传多样性指数最高的是叶片形状(1.201)。相关性分析表明,在数量性状中,冠幅与株高、叶宽、叶柄长度、花枝长度、花枝开张角度呈极显著正相关(P<0.01);在质量性状中,叶脉花青苷显色强度与主茎花青苷显色强度、叶片边缘花青苷显色强度和叶柄花青苷显色强度呈极显著正相关(P<0.01)。前8个主成分的累计贡献率达到64.32%,根据各性状的载荷量大小将各因子依次命名为产量因子、显色因子、叶光滑度因子、叶片边缘因子、叶片形状因子、叶片绿色因子和花枝角度因子。基于表型性状,以离差平方和法在遗传距离为10处将供试材料分为3个类群,类群Ⅰ有39份材料,占总数的24.53%;类群Ⅱ有38份材料,占总数的23.90%;群Ⅲ有82份材料,占总数的51.57%。  结论  159份艾纳香种质资源的表型性状具有丰富的遗传多样性,叶片形状的变异类型较为丰富,叶宽可作为日后选育高产艾纳香种质的指导目标性状。
水稻秸秆生物炭对3种土壤水溶态Cd动态变化的影响
张家康, 庄雅玲, 张力文, 林桂权, 林永崇, 李荭荭
摘要:
  目的   探讨淹水环境下生物炭对不同类型土壤中镉(Cd)的钝化效果,为生物炭修复镉污染稻田土壤提供科学依据。   方法   将外源Cd添加到黄壤、红壤性水稻土和棕壤中,分别设置对照和添加5%(W/W)生物炭处理,通过室内模拟试验探讨淹水条件下生物炭对不同土壤中Cd钝化效果的影响。   结果   淹水初期(1 d),与对照相比生物炭处理显著降低3种土壤溶液的pH值和土壤氧化还原电位值(Eh),但提高了土壤电导率值。随淹水时间增加,对照处理的3种土壤Eh值均逐渐降低,生物炭处理可使土壤氧化还原反应减缓。在淹水初期,对照处理下的3种土壤水溶态Cd含量由高到低依次为:黄壤(272.5 μg·L−1)>红壤性水稻土(23.48 μg·L−1)>棕壤(1.44 μg·L−1),生物炭处理的3种土壤水溶态Cd含量分别降低31.66%、75.04%和66.67%。随淹水时间增加,对照处理下黄壤和红壤性水稻土的水溶态Cd含量均逐渐降低,到淹水30 d时的降幅分别为89.34%和76.53%;而生物炭处理的水溶态Cd含量降低幅度较小,分别为85.41%和37.03%。淹水30 d之后,与对照处理相比,生物炭处理的黄壤、红壤性水稻土和棕壤有效态Cd含量分别降低17.3%、56.3%和12.4%。   结论   5%生物炭处理可显著降低3种土壤的水溶态Cd含量。但随淹水时间增加,3种土壤的对照处理与生物炭处理之间的水溶态Cd含量差值均缩小。淹水30 d后,与对照处理相比,生物炭对水稻土有效态Cd含量的降幅大于棕壤和黄壤。
番茄SlSIP1L12基因负调控种子萌发的研究
崔宝禄, 陈国平
摘要:
  目的  为鉴定番茄中Trihelix转录因子SIP1亚家族SlSIP1L12基因的生物功能,  方法  本研究利用RT-PCR分析了SlSIP1L12基因的表达模式、对外源激素和非生物胁迫的响应;利用RNAi干扰技术获得了SlSIP1L12转基因植株,利用ELISA鉴定转基因种子体内ABA的含量。  结果  (1)基因克隆分析表明:番茄AC++中,SlSIP1L12基因编码长度为1 125bp,编码374个氨基酸;进化分析表明,番茄SlSIP1L12基因进化明显。(2)表达模式证实:SlSIP1L12基因主要在茎、成熟叶中表达,花和果实中次之。(3)外源处理显示:SlSIP1L12受外源激素ABA和脱水胁迫诱导,说明SlSIP1L12功能与ABA有关。(4)SlSIP1L12转基因株系的种子发芽速度快于对照;相同条件下,胚根伸长速度明显比对照快。(5)发芽7 d时,转基因种子体内ABA含量明显小于对照。  结论  SlSIP1L12基因负调控番茄种子萌发的机制与ABA含量密切相关。
双孢蘑菇W192液体菌种摇瓶培养过程中的生理生化分析
戴建清
摘要:
  目的   研究双孢蘑菇W192液体菌种摇瓶培养菌丝体生长规律,为液体种子活力判断提供参考。   方法   采用液体摇瓶培养,分别测定了液体培养过程中双孢蘑菇菌丝体生物量、菌丝球数量和直径、发酵液pH值、还原糖和氨基氮含量、羧甲基纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶、漆酶胞外酶活性生理生化指标。   结果   摇瓶培养第8 d时,双孢蘑菇菌丝体生物量最大,为9.7 mg·mL-1;菌丝球数量最多,为880个·mL-1;菌丝体平均直径最大,为0.809 mm;培养液中还原糖、氨基氮含量最高,分别为5.228、0.079 mg·mL-1;羧甲基纤维素酶、淀粉酶、漆酶酶活性最高,分别为0.69 、2.11 、15.02 U。摇瓶培养第10 d时,酸性蛋白酶活性最高,酶活性为2.93 U。将摇瓶培养8 d的液体种子转接液体培养基中进行模拟发酵罐液体菌种培养,获得的菌丝球数量最多,达115个·mL-1,菌丝体生物量最大,达7.56 mg·mL-1   结论   双孢蘑菇液体菌种活性与上述指标具有一定的相关性,结合液体种子活力验证,判断第8 d的液体菌种活力最高,可作为液体种子用于发酵罐扩繁培养。
新型鹅星状病毒FJ-NP株的分离鉴定
林裕胜, 江锦秀, 张靖鹏, 游伟, 胡奇林
摘要:
  目的  2019年8月,福建省南平市某鹅场暴发的一种以痛风为主要的特征的疾病,该病在5~20日龄的雏鹅中发病率高达40%,死亡率为80%,为确定其病原。  方法  本研究对该场采集的3份样品进行了实验室检测和病原分离鉴定。  结果  PCR检测结果显示3份样品新型鹅星状病毒均为阳性;细菌分离结果显示,未分离到细菌,排除细菌感染引起;接种11日龄鹅胚未出现死亡,但胚体全身皮肤出现点状出血,肾脏、肺脏均有出血点,对收集尿囊液和组织样品进行PCR检测结果显示只有新型鹅星状病毒阳性,未检测到其他鹅常见病毒,将其命名为FJ-NP;并对分离株部分ORF2基因进行遗传进化分析,结果表明该分离株与安徽(GD AHAU2、AHAU3、AHAU5)、黑龙江(AstV-Goose-2018-HLJ01)和河南(AstV-HN02-Goose-1119-18、AstV-AH02-Goose-0715-18、AstV-HB02-Goose-0310-19、AstV-HN03-Goose-0402-19)株在同一进化分支上,与湖北、北京、福建株亲缘关系较远。  结论  本研究成功分离到了1株新型鹅星状病毒,同时进行ORF2部分基因遗传进化分析,为我省后续开展新型鹅星状病毒相关研究提供了素材。
响应面法优化亚临界水提取火龙果茎多糖
李国胜, 黄秀银, 白新鹏
摘要:
  目的  为了开发先进的火龙果茎多糖提取方法,采用响应面实验优化亚临界水法提取火龙果茎多糖的工艺,为火龙果茎多糖的亚临界水提取研究提供参考。  方法  在单因素试验基础上,以火龙果茎为原料,采用苯酚一硫酸法进行火龙果茎多糖含量的测定,用超声波预处理辅助,在温度、时间、液料比、pH值四个条件的影响下用响应面法对多糖的提取率进行了分析。  结果  亚临界水提取火龙果茎多糖的最佳条件为:提取温度144 ℃、提取时间19 min、液料比31∶1(mL·g−1) 、pH值5.9;优化条件下火龙果茎多糖的提取率是26.47%。  结论  建立的数学模型可对火龙果茎多糖的提取工艺参数进行分析和预测,采用响应面法优化火龙果茎多糖提取工艺具有可行性。因此,亚临界水法提取火龙果茎多糖具有广阔的应用前景。
沙门氏菌LAMP检测方法的建立及在蔬菜栽培土壤中的应用
吕新, 刘兰英, 陈丽华, 李玥仁
摘要:
  目的  建立沙门氏菌可视化环介导恒温扩增体系(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),并在快速检测蔬菜栽培土壤中应用,为蔬菜栽培土壤中沙门氏菌的防控提供技术支撑。  方法  根据沙门氏菌特有侵袭蛋白A (invA)基因序列设计可视化LAMP检测引物,并优化LAMP反应体系和反应条件,通过特异性试验、灵敏度试验和人工污染试验对LAMP检测方法进行验证,最后与国标检测方法对比检测蔬菜栽培土壤中沙门氏菌来验证该方法的准确性。  结果  优化后可视化LAMP检测方法,特异性试验结果显示除沙门氏菌的LAMP反应为阳性外,其余6个非沙门氏菌菌株的LAMP反应均为阴性,表明本LAMP检测方法具有良好的特异性;灵敏度试验结果显示本LAMP检测方法最低可以检测到7 CFU/25 μL的沙门氏菌DNA;人工污染试验结果显示本LAMP检测方法灵敏度达4×102 CFU·g−1,与国标检测方法对比检测蔬菜栽培土壤中沙门氏菌具有相同的准确性,但检测时间从5~7 d缩短至8 h内。  结论  本研究建立了快速、准确、灵敏的可视化恒温扩增体系,可以应用于蔬菜栽培土壤中沙门氏菌的快速检测。
烟草花叶病毒P54基因的原核表达与蛋白纯化
李聪, 田培洁, 张宇, 张德咏, 刘勇, 张松柏
摘要:
  目的  烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)属帚状病毒科(Vigaviridae)烟草花叶病毒属(Tobamovirus)病毒,可侵染36个科的400多种植物,一般可使作物减产20%~30%,严重时甚至造成绝收,因此,急需开展TMV的致病性及其分子机制研究。TMV的基因组为一条正义单链RNA,其基因组长度约6 400 bp,编码1个结构蛋白和2个非结构蛋白;其中,TMV编码的与复制相关通读P183基因中,编码一个P54基因,其功能及其作用分子机制还鲜见报道。为获得P54蛋白纯化样品,以期对P54蛋白的功能及其作用分子机制研究奠定基础。  方法  采用RT-PCR技术,从感染TMV的三生烟(Nicotiana tabacum var. Samsun NN)cDNA中扩增获得片段大小为1 425 bp的烟草花叶病毒P54基因,并克隆到原核表达载体pEASY-Blunt E1,转化E coli BL21(DE3)中进行诱导表达,包涵体透析复性后采用Ni-NTA柱层析纯化,Western-blotting进行鉴定。  结果  原核表达的TMV P54蛋白,主要以包涵体的形式存在;复性后经Ni-NTA柱层析纯化,SDS-PAGE表明纯化蛋白为一分子量约为60 kDa的单一条带。Western-blotting结果证实纯化蛋白为P54重组蛋白。  结论  本研究纯化得到了重组P54蛋白,为进一步深入研究P54蛋白的功能奠定基础。
利用物种特异性PCR技术快速鉴定南瓜实蝇
黄振, 侯有明, 郭琼霞, 陈韶萍
摘要:
  目的  快速鉴定我国进境植物检疫性害虫南瓜实蝇Bactrocera tau(Walker),防止该虫传入扩散。  方法  本研究基于物种特异性PCR(SS-PCR)技术,选取20种形态近似的常见实蝇,将南瓜实蝇作为阳性对照,提取基因组DNA模板,选用mt DNA COⅠ序列,检查同源系列,设计筛选1对可快速准确鉴定南瓜实蝇的种特异性引物NF404和NR610,并进行PCR检测和验证,建立一种利用种特异性引物的快速鉴定方法。  结果  南瓜实蝇在207 bp的位置扩增出一条清晰且单一的目标条带,其余果实蝇未见条带。将截获的南瓜实蝇与其同亚属的近缘种具条实蝇、瓜实蝇的不同虫态和成虫部分虫体组织的虫样,采用本实验室建立的SS-PCR鉴定方法进行验证,结果一致。  结论  本试验建立的南瓜实蝇的SS-PCR鉴定方法种特异性和稳定性强,能快速鉴定目标种类,解决口岸进境果蔬中截获实蝇幼虫、蛹等不同虫态和残体难于快速鉴定问题。
水产养殖废水脱氮除磷微藻的筛选
贾纬, 聂毅磊, 陈宏, 罗立津, 乐占线, 庄鸿, 郑军荣
摘要:
  目的  筛选对养殖废水具有脱氮除磷效果的微藻藻种。  方法  选取小球藻JY-1(Chlorella sp.JY-1)、小球藻SY-4(Chlorella sp.SY-4)以及链带藻SH-1(Desmodesmus sp. SH-1)等3株微藻为研究对象,研究其对水产养殖废水脱氮除磷的效果。  结果  培养5 d,JY-1、SY-4和SH-1在7‰±1‰盐度养殖废水中的细胞含量分别为1.56×107、1.47×107、6.62×106个·mL-1;JY-1、SY-4和SH-1对养殖废水中总氮的去除率分别为50.36%、41.51%和49.74%;氨态氮(NH4+-N)的去除率分别为96.29%、84.92%和96.65%;硝态氮(NO3-N)的去除率分别为15.84%、3.69%和12.56%;总磷(PO43-P)的去除率分别为93.51%、82.38%和94.25%;对亚硝态氮的去除效果不明显;3株藻在5‰、10‰、20‰和30‰盐度的培养基中均可以正常生长。JY-1在养殖废水中的生长能力和对水体净化能力均优于小球藻SY-4和链带藻SH-1。  结论  小球藻JY-1对水产养殖废水具有较好的脱氮除磷效果。本研究为应用微藻进行养殖废水脱氮除磷处理提供了参考数据。
甜瓜蔓枯病菌原生质体制备及再生体系研究
毛建才, 王豪杰, 李俊华, 翟文强
摘要:
  目的  建立高效的病原菌原生质体制备和再生体系,明确甜瓜蔓枯病菌的致病机理。  方法  采用单因素分析法,利用2种混合酶20 g·L−1 Driselase和8 g·L−1 Lysing enzymes,以不同菌龄、摇培转速、不同酶解时间、温度、渗透压稳定剂的种类及pH、再生培养基为研究条件;对甜瓜蔓枯病菌原生质体的制备及再生体系进行优化。  结果  结果表明:以培养36 h左右的菌丝体为材料,以0.7 mol·L−1 NaCl做为渗透压稳定剂(pH=7),用20 g·L−1 Driselase和8 g·L−1 Lysing enzymes在30 ℃、140 r·min−1条件下酶解4 h,原生质体的产量可达9.65×107个·mL−1;以琼脂含量为0.6%的SR培养基作为再生培养基,甜瓜蔓枯病菌的再生率可达22.53%;原生质体的再生率在存放10 h内下降迅速,10 h后下降速度逐渐平缓。  结论  确定了蔓枯病菌的高效原生质体制备与再生体系,为该菌株遗传转化体系的建立奠定基础。
瘤菌根菌对铁皮石斛生长和营养成分的影响
王伟英, 邹晖, 戴艺民, 林江波
摘要:
  目的  为了解瘤菌根菌与铁皮石斛建立共生关系后对植株地上部生长和营养物质积累的影响。  方法  本研究通过液体培养瘤菌根菌属菌株,浇灌无菌盆栽铁皮石斛苗的根部共培养,观察铁皮石斛植株的农艺性状的变化,并比较不同年限铁皮石斛鲜条的营养物质含量的变化。  结果  试验结果表明,接菌处理的铁皮石斛盆栽苗比未接菌的对照生长旺盛,叶色浓绿,植株健壮,1年条和2年条的有效茎杆数分别增加了65.67%和74.25%,单茎重分别增加了55.29%和51.45%,差异显著(P<0.05),提高了铁皮石斛的产量。接菌后还提高了粗多糖、石斛碱、粗蛋白和氨基酸的含量,其中接菌后1年条的粗多糖和粗蛋白含量较未接菌的对照分别提高了30.39%和18.7%,差异显著(P<0.05);接菌后1年条和2年条的氨基酸总量显著增加,分别增加了27%和30.25%;粗纤维和灰分的含量在接菌后减少,分别减少了17.76%和36.36%,差异显著(P<0.05)。  结论  接入瘤菌根菌能够显著提高铁皮石斛的产量和营养成分的含量,说明增加产量与提高营养物质含量并不矛盾,这对铁皮石斛的有机菌肥的开发应用、人工栽培有机种植以及鲜条采收时间具有重要的指导意义。
澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1MiSTPP4克隆与生物信息学分析
李季东, 杨祥燕, 蔡元保, 李穆, 曾黎明, 黄思婕, 巫辅民, 林玉虹, 郑文武, 黄锦媛
摘要:
  目的  通过澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1MiSTPP4克隆与生物信息学分析,以期为阐明澳洲坚果蛋白磷酸酶基因的功能及作用机制提供参考依据。  方法  基于澳洲坚果转录组数据和RT-PCR方法克隆澳洲坚果蛋白磷酸酶基因,利用生物信息学分析基因编码蛋白质的同源性、系统进化、理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜域和信号肽。  结果  获得2个新的澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1MiSTPP4,GenBank登录号分别为MT374548和MT374551。氨基酸同源性分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与其他植物来源的PP1蛋白具有极高的序列相似度,都包含典型结构域MPP_PP1_PPKL。进化树分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与PP1家族蛋白的亲缘关系最近。蛋白基本理化性质分析表明,MiSTPP1是一个不稳定的亲水性蛋白,而MiSTPP4蛋白是一个稳定的亲水性蛋白。磷酸化位点分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4都以丝氨酸和苏氨酸磷酸化为主。亚细胞定位、跨膜域和信号肽预测表明,MiSTPP1和MiSTPP4极可能定位于细胞质,且都为非分泌蛋白和非跨膜蛋白。而且,MiSTPP1和MiSTPP4的二级结构和三维结构主要含有α螺旋和无规则卷曲。  结论  MiSTPP1MiSTPP4属于蛋白磷酸酶PP1家族基因,推测在响应逆境胁迫、信号转导等生理生化过程中发挥作用。
内源激素含量变化以及与激素合成相关基因表达量对毕克齐山药块茎膨大的影响
敖兰吉亚, 季祥, 邵盈, 赵令敏, 张艳芳, 霍秀文
摘要:
  目的  通过分析毕克齐山药中内源激素含量与淀粉含量、可溶性总糖含量和还原糖含量的相关性,以及与其相关合成基因表达量的相关性分析,探究毕克齐山药块茎膨大的机理。  方法  以毕克齐山药5个不同生长期块茎为材料,采用酶联免疫吸附法分别测定脱落酸、赤霉素、生长素、茉莉酸、玉米素、异戊稀基腺苷这6种内源激素含量,采用高效液相色谱仪测定方法测定水杨酸含量。  结果  内源激素生长素(IAA)、玉米素(ZR)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)含量与山药块茎形态指标正相关;内源激素赤霉素(GA3)、异戊稀基腺苷(IPA)含量与形态指标负相关;内源激素IAA含量与山药块茎周长和块茎直径显著正相关;内源激素GA3含量与块茎长度显著负相关;与IAA相关的基因与内源激素IAA含量显著负相关  结论  内源激素IAA、ZR、ABA、JA和SA促进山药块茎膨大;内源激素GA3、IPA抑制山药块茎生长;内源激素IAA促进山药增粗;内源激素GA3抑制其伸长生长;与IAA相关的基因的下调表达对IAA的合成有促进作用,即正调控内源激素IAA含量。